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Purificazione e controllo qualità di complessi di septina ricombinanti per la ricostituzione cellula-free
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Purification and Quality Control of Recombinant Septin Complexes for Cell-Free Reconstitution
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Purificazione e controllo qualità di complessi di septina ricombinanti per la ricostituzione cellula-free

DOI:
10.3791/63871-v

•

11:50 min

•

June 23, 2022

•

, , , , , ,
1Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft,Delft University of Technology, 2Institut Fresnel, CNRS UMR7249,Aix Marseille Univ, Centrale Marseille, 3Institut Curie, Université PSL,Sorbonne Université

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:47Purification of Septin Hetero-Oligomers
  • 04:29Quality Control of Purity and Integrity of the Septin Hetero-Oligomer
  • 07:34Septin Functional Quality Control via Polymerization Analysis
  • 08:57Results: Analysis of Purified Septin Quality
  • 11:01Conclusion

Summary

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La ricostituzione in vitro delle proteine citoscheletriche è uno strumento vitale per comprendere le proprietà funzionali di base di queste proteine. Il presente articolo descrive un protocollo per purificare e valutare la qualità dei complessi di settina ricombinanti, che svolgono un ruolo centrale nella divisione e migrazione cellulare.

Tags

Recombinant Septin ComplexesCell-free ReconstitutionPurificationQuality ControlAffinity ChromatographyHis-tagged SeptinsStrep-II Tagged ProteinsFPLCBacterial ExpressionIPTG InductionCell LysisSonicationCentrifugationOptical DensityMsfGFPMEGFPProtein Degradation

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