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Visualización de la dinámica de acoplamiento de actina y microtúbulos in vitro mediante microscopía de fluorescencia de reflexión interna total (TIRF)
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Visualizing Actin and Microtubule Coupling Dynamics In Vitro by Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy
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Visualización de la dinámica de acoplamiento de actina y microtúbulos in vitro mediante microscopía de fluorescencia de reflexión interna total (TIRF)

DOI:
10.3791/64074-v

•

08:44 min

•

July 20, 2022

•

1Department of Biochemistry & Molecular Biology, and Department of Neuroscience & Physiology,State University of New York (SUNY) Upstate Medical University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:40Coating Cleaned Coverslips with mPEG- and Biotin-PEG-Silane
  • 01:21Assembling Imaging Flow Chambers
  • 02:50Conditioning of Perfusion Chambers
  • 03:47Microscope Preparation
  • 04:40Preparation of Protein Reaction Mixes
  • 06:02Image Actin and Microtubule Dynamics
  • 06:43Results: Example Measurements of Microtubules and Actin Filament Dynamics
  • 08:14Conclusion

Summary

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Este protocolo es una guía para visualizar actina dinámica y microtúbulos utilizando un ensayo de microscopía de fluorescencia interna total (TIRF) in vitro .

Tags

Keywords: ActinMicrotubuleTIRF MicroscopyPEG-SilaneBiotin-PEG-SilaneCover SlipImaging ChamberEpoxy ResinPerfusion ChamberConditioning SolutionsTotal Internal Reflection Fluorescence

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