/
/
Cellefri proteinsyntese fra exonuklease-mangelfulde cellulære ekstrakter ved hjælp af lineære DNA-skabeloner
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
1INRAe, AgroParisTech, Micalis Institute,Université Paris-Saclay, 2Helmholtz Institute for RNA-based Infection Research (HIRI),Helmholtz-Centre for Infection Research (HZI), 3Medical Faculty,University of Würzburg, 4Centre de Biochimie Structurale, INSERM U1054, CNRS UMR 5048,University of Montpellier
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:50Cell Culture and Lysate Preparation
- 04:17Cell-Free Buffer Calibration for Linear DNA
- 05:49Experimental Execution
- 06:33Results: Expression in Cell-Free Protein Synthesis Systems Using Linear DNA Templates
- 07:26Conclusion
Her præsenteres en protokol til fremstilling og bufferkalibrering af celleekstrakter fra exonuklease V knockout-stammer af Escherichia coli BL21 Rosetta2 (ΔrecBCD og ΔrecB). Dette er en hurtig, nem og direkte tilgang til ekspression i cellefrie proteinsyntesesystemer ved hjælp af lineære DNA-skabeloner.
