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Synthèse de protéines acellulaires à partir d’extraits cellulaires déficients en exonucléase utilisant des modèles d’ADN linéaires
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1INRAe, AgroParisTech, Micalis Institute,Université Paris-Saclay, 2Helmholtz Institute for RNA-based Infection Research (HIRI),Helmholtz-Centre for Infection Research (HZI), 3Medical Faculty,University of Würzburg, 4Centre de Biochimie Structurale, INSERM U1054, CNRS UMR 5048,University of Montpellier
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:50Cell Culture and Lysate Preparation
- 04:17Cell-Free Buffer Calibration for Linear DNA
- 05:49Experimental Execution
- 06:33Results: Expression in Cell-Free Protein Synthesis Systems Using Linear DNA Templates
- 07:26Conclusion
Un protocole pour la préparation et l’étalonnage tampon d’extraits cellulaires de souches knockout d’exonucléase V d’Escherichia coli BL21 Rosetta2 (ΔrecBCD et ΔrecB) est présenté ici. Il s’agit d’une approche rapide, facile et directe pour l’expression dans les systèmes de synthèse de protéines acellulaires utilisant des modèles d’ADN linéaires.
