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Chapitres
- 00:04Introduction
- 01:04Slide and Coverslip Cleaning
- 03:04mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
- 05:13Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
- 06:23Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
- 07:47Data Analysis
- 08:39Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
- 10:11Conclusion
Diese Studie stellt ein detailliertes Verfahren zur Durchführung von Einzelmolekül-Fluoreszenz-Resonanzenergietransfer-Experimenten (smFRET) an G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) unter Verwendung ortsspezifischer Markierung durch unnatürliche Aminosäureinkorporation (UAA) vor. Das Protokoll bietet eine Schritt-für-Schritt-Anleitung für die Vorbereitung von smFRET-Proben, Experimente und Datenanalysen.
