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Kombination von Clearing- und Fluoreszenzmikroskopie zur Visualisierung von Veränderungen der Genexpression und physiologischen Reaktionen auf Plasmodiophora brassicae
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Biologie
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Journal JoVE Biologie
Combining Clearing and Fluorescence Microscopy for Visualising Changes in Gene Expression and Physiological Responses to Plasmodiophora brassicae
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Kombination von Clearing- und Fluoreszenzmikroskopie zur Visualisierung von Veränderungen der Genexpression und physiologischen Reaktionen auf Plasmodiophora brassicae

DOI:
10.3791/64297-v

•

06:58 min

•

August 05, 2022

•

, , , , , ,
1Integrative Plant Biology Team,Institute of Plant Genetics Polish Academy of Sciences, 2ZMBP-Center for Plant Molecular Biology,University of Tübingen, 3Department of General Botany, Institute of Experimental Biology, Faculty of Biology,Adam Mickiewicz University

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:36Tissue Preparation and Fixation
  • 02:13Tissue Embedding and Sectioning
  • 03:03Vibratome Sectioning and Specimen Clearing
  • 04:03Staining Procedure and Microscopy
  • 04:49Results: Microscopic Analysis of the Biotrophic Interaction and Gene Expression Regulations Between Plasmodiophora brassicae and Arabidopsis Plants
  • 06:06Conclusion

Summary

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Das vorliegende Protokoll beschreibt eine optimierte Methode zur histologischen Beobachtung von Gallen, die durch Plasmodiophora brassicae induziert werden. Vibratomschnitte von Hypokotylen werden vor der Fluoreszenzbildgebung entfernt, um die Beteiligung von Transkriptionsfaktoren und Phytohormonen während des Krankheitsverlaufs zu untersuchen. Dieses Protokoll überwindet Einschränkungen bei der Einbettung von Harz und ermöglicht die Visualisierung fluoreszierender Proteine in planta .

Tags

Plasmodiophora BrassicaeClubrootGene ExpressionFluorescence MicroscopyClearingGallsPhytohormoneLignificationPlant-pathogen InteractionAgarose EmbeddingVibratome Sectioning

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