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유전자 조작 마우스 모델 개발을 위한 배아 줄기 세포에서 CRISPR/Cas9 매개 고효율 유전자 표적화
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Journal JoVE Biologie du développement
CRISPR/Cas9-Mediated Highly Efficient Gene Targeting in Embryonic Stem Cells for Developing Gene-Manipulated Mouse Models
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유전자 조작 마우스 모델 개발을 위한 배아 줄기 세포에서 CRISPR/Cas9 매개 고효율 유전자 표적화

DOI:
10.3791/64385-v

•

10:57 min

•

August 24, 2022

•

, ,
1Laboratory of Reproductive Systems Biology, Center for Experimental Medicine and Systems Biology, The Institute of Medical Science,The University of Tokyo, 2Research Institute for Microbial Diseases,Osaka University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:06Gene Targeting of Embryonic Stem Cells (ESCs)
  • 04:16PCR Genotyping of Targeted ESCs
  • 07:02Preparation of Eight-Cell Stage Embryo and Microinjection of ESCs
  • 09:49Results: Screening of Targeted ESC Clones
  • 10:10Conclusion

Summary

Traduction automatique

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여기에서는 배아 줄기 세포를 사용하여 유전자 변형 마우스 모델, 특히 대형 DNA 녹인 (KI)을 개발하기위한 프로토콜을 제시합니다. 이 프로토콜은 CRISPR/Cas9 게놈 편집을 사용하여 조정되어 기존의 상동 재조합 매개 선형화된 DNA 표적화 방법에 비해 KI 효율이 크게 향상되었습니다.

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Keywords: CRISPR/Cas9Gene TargetingEmbryonic Stem CellsGene-manipulated Mouse ModelsGene FunctionsIn VivoDrug SelectionMouse Embryonic FibroblastESCMEFElectroporationCas9 RNP DNA

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