Här presenterar vi ett protokoll för att utveckla genmodifierade musmodeller med embryonala stamceller, speciellt för stora DNA-knock-in (KI). Detta protokoll är inställt med hjälp av CRISPR/Cas9-genomredigering, vilket resulterar i signifikant förbättrad KI-effektivitet jämfört med den konventionella homologa rekombinationsmedierade linjäriserade DNA-inriktningsmetoden.