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In vitro Ensaios de Clivagem usando Caspases de Drosophila Recombinante Purificada para Triagem de Substrato
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Journal JoVE Bio-ingénierie
In Vitro Cleavage Assays using Purified Recombinant Drosophila Caspases for Substrate Screening

In vitro Ensaios de Clivagem usando Caspases de Drosophila Recombinante Purificada para Triagem de Substrato

DOI:
10.3791/64392-v

•

08:16 min

•

October 06, 2022

•

,
1Department of Molecular, Cell and Cancer Biology,UMass Chan Medical School

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:15Small‐Scale Recombinant Caspases Extraction
  • 02:34Small‐Scale His‐Tagged Caspases Purification
  • 04:09In Vitro Cleavage Assay with Substrates Generated with RRL
  • 05:29Results: In Vitro Cleavage Assays to Express and Purify Recombinant Drosophila Caspases
  • 07:33Conclusion

Summary

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Aqui apresentamos um protocolo para expressar e purificar Drosophila caspases recombinantes Dronc e Drice, e seu uso em ensaios de clivagem in vitro .

Tags

In Vitro Cleavage AssayCaspasesDrosophilaDroncRecombinant ProteinsSubstrate ScreeningCell LysisNi-NTA AgarosePurificationEnzymatic Activity

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