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Bestimmung der S-Phasendauer mittels 5-Ethynyl-2'-Desoxyuridin-Einbau in Saccharomyces cerevisiae
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Determination of S-Phase Duration Using 5-Ethynyl-2′-deoxyuridine Incorporation in Saccharomyces cerevisiae
DOI:

08:40 min

October 21, 2022

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
  • 02:00EdU Labeling
  • 02:40Cell Fixation and Permeabilization
  • 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
  • 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
  • 07:56Conclusion

Summary

Traduction automatique

Wir beschreiben zwei komplementäre Protokolle zur genauen Bestimmung der S-Phasendauer in S. cerevisiae unter Verwendung von EdU, einem Thymidinanalogon, das in vivo eingebaut und mittels Click-Chemie durch Mikroskopie und Durchflusszytometrie nachgewiesen wird. Es ermöglicht die einfache Charakterisierung der Dauer der DNA-Replikation und übersehener Replikationsdefekte in Mutanten.

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