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Determinación de la duración de la fase S mediante la incorporación de 5-etinil-2'-desoxiuridina en Saccharomyces cerevisiae
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Determination of S-Phase Duration Using 5-Ethynyl-2′-deoxyuridine Incorporation in Saccharomyces cerevisiae
DOI:

08:40 min

October 21, 2022

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
  • 02:00EdU Labeling
  • 02:40Cell Fixation and Permeabilization
  • 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
  • 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
  • 07:56Conclusion

Summary

Traduction automatique

Describimos dos protocolos complementarios para determinar con precisión la duración de la fase S en S. cerevisiae utilizando EdU, un análogo de la timidina, que se incorpora in vivo y se detecta mediante química Click por microscopía y citometría de flujo. Permite la fácil caracterización de la duración de la replicación del ADN y los defectos de replicación pasados por alto en los mutantes.

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