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使用全内反射荧光(TIRF)显微镜对脂质双层中的横向迁移率和离子通道活性进行单分子成像
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Biochimie
Single-Molecule Imaging of Lateral Mobility and Ion Channel Activity in Lipid Bilayers using Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy
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使用全内反射荧光(TIRF)显微镜对脂质双层中的横向迁移率和离子通道活性进行单分子成像
DOI:
10.3791/64970-v
•
08:55 min
•
February 17, 2023
•
Shuo Wang
,
Stephan Nussberger
1
Biophysics Department, Institute of Biomaterials and Biomolecular Systems
,
University of Stuttgart
Chapitres
00:05
Introduction
00:43
Preparation of Lipids and Agarose Hydrogel
01:33
PMMA Chamber Assembly and Lipid Monolayer Formation
03:06
Preparation of Lipid-Coated Aqueous Droplets in Hexadecane/Silicone Oil Solution
04:17
Preparation and Imaging of Single Ion Channels in DIB Membranes
06:49
Results: Isolation of TOM-CC and Correlation of Channel Activity with Lateral Mobility of TOM-CC
08:18
Conclusion
Summary
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该协议描述了如何使用TIRF显微镜来跟踪单个离子通道并确定它们在支持的脂质膜中的活性,从而定义侧向膜运动和通道功能之间的相互作用。它描述了如何制备膜、记录数据并分析结果。
Tags
Keywords: Single-molecule Imaging
Lateral Mobility
Ion Channel Activity
Lipid Bilayers
Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy
Membrane Proteins
DPhPC
Hexadecane
Silicone Oil
Agarose Hydrogel
PMMA Chamber
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