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Étiquetage sélective des protéines de surface cellulaire utilisant CyDye DIGE Fluor Colorants Minimal
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Selective Labelling of Cell-surface Proteins using CyDye DIGE Fluor Minimal Dyes
DOI:

14:43 min

November 26, 2008

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Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:10Introduction to Cell Surface Protein Labeling with Ettan DIGE System
  • 01:12Overview of the Experiment
  • 02:19Sample Preparation
  • 03:13Labeling with CyDye DIGE Fluors
  • 04:03Incubation and Quenching
  • 04:45Cell Lysis
  • 05:29Rehydration of IPG Strips
  • 06:31First Dimension ISO-Electric Focusing
  • 07:27Gel Casting
  • 07:55Equilibration of IPG Strips
  • 09:43Second Dimension SDS-Page
  • 10:29Gel Scanning
  • 10:52Results of Cell Surface Protein Labeling
  • 11:21Comparison with Fractionated Runs
  • 12:302D DIGE Analysis
  • 13:27Conclusions

Summary

Traduction automatique

Une méthode simple et spécifique a été démontrée pour le marquage fluorescent et une meilleure détection des protéines de surface cellulaire sans une étape de fractionnement. L'abondance différentielle des protéines de surface cellulaire a été analysée par électrophorèse bidimensionnelle (2-D) et Ettan ™ technologie DIGE.

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