Dissezione, elaborazione istologica e analisi dell'espressione genica del tessuto adiposo bruno sopraclavicolare murino
March 29th, 2024
In questo articolo, forniamo una procedura pratica per la dissezione e l'esecuzione di analisi istologiche e di espressione genica del tessuto adiposo bruno sopraclavicolare murino.
1 Il nostro laboratorio si concentra sulla definizionedel tessuto adiposo bruno sopraclavicolare 3 o SCBAT come un prezioso deposito 4 per l'analisi del grasso bruno a causa delle sue somiglianze anatomiche 5 con il tessuto adiposo bruno umano. 6 Questo protocollo ha lo scopo di aumentare l'accessibilità7 della ricerca SCBAT. 8 Questo deposito può essere intimidatorio a causa delle sue piccole dimensioni 9 e della vicinanza a grandi vene nel collo, 10 quindi è imperativo fornire 11 un metodo semplice di estrazione e lavorazione SCBAT.
12 La nostra metodologia si distingue13 in primo luogo per l'uso di un microscopio da dissezione 14 durante l'estrazione dell'SCBAT. 15 Ciò aumenta la precisione 16 e l'efficienza di estrazione, 17 che sono entrambi critici quando si lavora 18 con un deposito di tessuti così piccolo. 19 In secondo luogo, abbiamo omogeneizzato i campioni di SCBAT congelati 20 prima di eseguire l'analisi dell'espressione genica 21 per aumentare la resa dell'RNA per compensare 22 una quantità così bassa di tessuto disponibile.
23 Attualmente ci stiamo concentrando sulla definizione24 del rivestimento genetico dell'SCBAT, 25 sull'identificazione delle reti di trasfigurazione 26 che ne regolano lo sviluppo, 27 e sullo sviluppo di un modello cerebrale 28 per esplorare la sua funzione fisiologica nell'uomo.
Panoramica
Questo studio fornisce un protocollo dettagliato per la dissezione del tessuto adiposo bruno sopraclaveare (scBAT) dai topi, considerato un modello prezioso per l'analisi del grasso bruno grazie alle sue somiglianze anatomiche con il tessuto adiposo bruno umano. L'obiettivo è migliorare l'accessibilità alla ricerca sullo scBAT attraverso una dissezione precisa e successive analisi istologiche e di espressione genica.
Componenti principali dello studio
Area di ricerca
- Tessuto adiposo bruno sopraclaveare (scBAT)
- Analisi dell'espressione genica
- Tecniche istologiche
Conoscenze di base
- Lo scBAT è riconosciuto per la sua potenziale importanza nella ricerca metabolica.
- La prossimità anatomica alle principali vene pone sfide nella dissezione.
- È stato identificato il bisogno di metodi di estrazione accessibili e accurati.
Metodi utilizzati
- Dissezione utilizzando un microscopio per precisione.
- Analisi dell'espressione genica dopo l'omogeneizzazione del tessuto.
- Colorazione con ematossilina ed eosina per la valutazione istologica.
Risultati principali
- Il protocollo descritto migliora l'efficienza di estrazione e la qualità dei dati di espressione genica.
- Lo scBAT mostra strutture tissutali caratteristiche del tessuto adiposo bruno.
- Lo studio pone le basi per la comprensione della linea genetica e dei ruoli fisiologici dello scBAT.
Conclusioni
- Questo protocollo consente una ricerca più efficace sui ruoli dello scBAT nel metabolismo.
- I risultati contribuiscono al più ampio campo della biologia del tessuto adiposo.
Domande frequenti
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:24
Dissection of Supraclavicular Brown Adipose Tissue in Mice
2:54
Supraclavicular Brown Adipose Tissue Processing for Hematoxylin and Eosin Staining
4:49
Total RNA Isolation from Supraclavicular Brown Adipose Tissue for Gene Expression Analysis
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