Summary

الخلايا الجذعية الجنينية المستمدة من الخلايا البطانية لعلاج نقص التروية Hindlimb

Published: January 23, 2009
doi:

Summary

العملية الجراحية لتسليم الخلايا الجذعية الجنينية المشتقة من الخلايا البطانية ويتجلى في hindlimb الدماغية ، مع المنظمات غير الغازية التي تتبع التصوير تلألؤ بيولوجي.

Abstract

الشرايين المحيطية المرض (PAD) النتائج من تضييق الشرايين الطرفية التي تزود الدم المؤكسج والمواد الغذائية في الساقين والقدمين ، وهذا يسبب أعراض أمراض مثل العرج المتقطع (الألم مع المشي) ، تقرحات مؤلمة الدماغية ، أو حتى غرغرينا الأطراف للخطر. ويعتقد عموما أن بطانة الأوعية الدموية ، وهو أحادي الطبقة من الخلايا البطانية التي تستثمر سطح اللمعية جميع الأوعية الدموية واللمفاوية ، يلعب دورا مهيمنا في التوازن الأوعية الدموية وتجديد الأوعية الدموية. ربما نتيجة لذلك ، المستندة إلى الخلايا الجذعية لتجديد البطانة يكون نهجا واعدا لعلاج PAD.

في هذا الفيديو ، وندلل على زرع الخلايا الجذعية الجنينية (ESC) المشتقة من الخلايا البطانية لعلاج نقص التروية hindimb الأحادية بوصفها نموذجا للPAD ، تليها غير الغازية تتبع خلية صاروخ موجه في البقاء والتصوير تلألؤ بيولوجي. وسيتم وصف المواد وإجراءات محددة لتسليم خلية والتصوير. هذا البروتوكول يلي منشور آخر في وصفه للتحريض نقص التروية hindlimb بواسطة Niiyama آخرون 1

Protocol

1. التفريق بين المجالس الاقتصادية والاجتماعية الفئران الى الخلايا البطانية يوصف بروتوكول للتمييز بين المجالس الاقتصادية والاجتماعية في الخلايا البطانية في مكان آخر وليس التركيز على هذا البروتوكول 2،3. باختصار …

Discussion

المجالس الاقتصادية والاجتماعية هي مصدر الخلايا واعدة لعلاج نقص التروية الأنسجة بسبب اللدونة من التمايز وقدرتها على أن تؤدي إلى خلية تضم الأنساب كل الطبقات الجرثومية الثلاث ، بما في ذلك الخلايا البطانية. للتغلب على المخاوف الأخلاقية المرتبطة المجالس الاقتصادية والاجتماعية ، ?…

Acknowledgements

المؤلفان بالشكر اندريا Axtell ، إيتوه ساتوشي ، MD ، Velotta جيف ، MD ، هويت غرانت ، روبرت روبنز C. ، MD ، يو جين ، MD ، تيم دويل ، دكتوراه ، والتصوير ستانفورد الحيوانات الصغيرة الأساسية للحصول على المساعدة التقنية. الكتاب أيضا أن أشكر AM بيكفورد ، وشركة للحصول على الدعم من المعدات البيطرية. وأيد هذا البحث عن طريق المنح البحثية من المعاهد الوطنية للصحة (R01 HL – 75774 ، CA098303 R01 ، R21 HL085743 ، 1K12 HL087746) ، والتبغ كاليفورنيا بحوث أمراض ذات صلة برنامج من جامعة كاليفورنيا (15IT – 0257 و1514RT 0169) ، ومعهد كاليفورنيا للطب التجديدي (RS1 – 00183).

معتمد من قبل NH الزمالة من جمعية القلب الاميركية. ويمكن لجمعية القلب.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Surgical tools Tool Fine Science Tools    
Syringe needle Tool BD   28G insulin syringe is preferred
Phosphate Buffered Saline Reagent Invitrogen    
D-luciferin Reagent Biosynth International, Inc   Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS
IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software Equipment Xenogen Corporation    

Riferimenti

  1. Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. Murine model of hindlimb ischemia. JoVE. , (2008).
  2. Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. Endothelial cells derived from human embryonic stem cells. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).
  3. Yamashita, J., Itoh, H., Hirashima, M., Ogawa, M., Nishikawa, S., Yurugi, T., Naito, M., Nakao, K., Nishikawa, S. Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors. Nature. 408, 926-926 (2000).
  4. De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging. Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).
  5. Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization. J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).
  6. Cook, M. J. The anatomy of the laboratory mouse. , (1976).
  7. Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nature Med. 4, 245-247 (1998).
  8. Ray, P., De, A., Min, J. J., Tsien, R. Y., Gambhir, S. S. Imaging tri-fusion multimodality reporter gene expression in living subjects. Cancer Res. 64, 1323-1330 (2004).
  9. Huang, N. F., Lee, R. J., Li, S. Chemical and physical regulation of stem cells and progenitor cells: potential for cardiovascular tissue engineering. Tissue Eng. 13, 1809-1823 (2007).
  10. Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery. Circulation. 113, 1005-1114 (2006).
  11. Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
check_url/it/1034?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Huang, N. F., Niiyama, H., De, A., Gambhir, S. S., Cooke, J. P. Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia. J. Vis. Exp. (23), e1034, doi:10.3791/1034 (2009).

View Video