後肢虚血の治療のための胚性幹細胞由来血管内皮細胞
Summary
胚性幹細胞の配信のための外科的処置は、虚血後肢への細胞由来の内皮細胞は、生物発光イメージングによる非侵襲的な追跡と、示されている。
Abstract
脚と足に酸素化血液と栄養分を供給する末梢動脈の狭窄から末梢動脈疾患（PAD）の結果は、この病理は、このような間欠性跛行（歩くと痛み）、痛みを伴う虚血性潰瘍、あるいは四肢を脅かす壊疽などの症状を引き起こします。これは、一般的に血管内皮、すべての血液やリンパ管の管腔表面を投資する内皮細胞の単層は、血管の恒常性と血管再生で主要な役割を果たしていると考えられている。その結果、内皮細胞の幹細胞ベースの再生には、PADを治療するための有望なアプローチがあります。
このビデオでは、我々は胚性幹細胞（ESC）由来の生物発光イメージングによるホーミング細胞と生存の非侵襲的な追跡が続くPADのモデルとして一方的hindimbの虚血の治療のための内皮細胞の移植を示しています。細胞送達およびイメージングのための特定の材料および手順について説明する。このプロトコルは、新山らによる後肢虚血の誘導を記述する別のパブリケーションに従います。1
Protocol
Discussion
ESCは、ために分化し、血管内皮細胞を含むすべての3つの胚芽層を、前記の細胞系譜を生じさせる能力の彼らの可塑性の組織の虚血の治療において有望な細胞源です。 ES細胞に関連する倫理的な問題を克服するために、誘導多能性幹細胞（性IPSC）倫理的な問題を克服する代替の多能性幹細胞の源とすることができる。 ESCのほかに、そのような内皮前駆細胞（EPC）と造血幹細胞（HSC）のような成体幹細胞…
Acknowledgements
著者はアンドレアアクステル聡伊藤、MD、ジェフVelotta、MD、グラントホイト、ロバートC.ロビンス、MD、金玉、MD、ティムドイル博士、および技術支援のためのスタンフォード大学小動物のイメージングコアを感謝。また、作者は獣医機器のサポートのためにAMビックフォード社に感謝。この研究は国立衛生研究所（R01 HL – 75774、R01 CA098303、R21 HL085743、1K12 HL087746）、カリフォルニア大学のカリフォルニア州のたばこ関連病研究プログラム（15IT – 0257と1514RT – 0169）からの研究補助金によって支えられて、および再生医療（RS1 – 00183）のためのカリフォルニア工科大学。
NHは、アメリカ心臓協会からのフェローシップでサポートされています。心臓協会ができます。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Surgical tools | Tool | Fine Science Tools | ||
| Syringe needle | Tool | BD | 28G insulin syringe is preferred | |
| Phosphate Buffered Saline | Reagent | Invitrogen | ||
| D-luciferin | Reagent | Biosynth International, Inc | Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS | |
| IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software | Equipment | Xenogen Corporation |
Riferimenti
- Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. Murine model of hindlimb ischemia. JoVE. , (2008).
- Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. Endothelial cells derived from human embryonic stem cells. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).
- Yamashita, J., Itoh, H., Hirashima, M., Ogawa, M., Nishikawa, S., Yurugi, T., Naito, M., Nakao, K., Nishikawa, S. Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors. Nature. 408, 926-926 (2000).
- De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging. Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).
- Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization. J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).
- Cook, M. J. The anatomy of the laboratory mouse. , (1976).
- Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nature Med. 4, 245-247 (1998).
- Ray, P., De, A., Min, J. J., Tsien, R. Y., Gambhir, S. S. Imaging tri-fusion multimodality reporter gene expression in living subjects. Cancer Res. 64, 1323-1330 (2004).
- Huang, N. F., Lee, R. J., Li, S. Chemical and physical regulation of stem cells and progenitor cells: potential for cardiovascular tissue engineering. Tissue Eng. 13, 1809-1823 (2007).
- Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery. Circulation. 113, 1005-1114 (2006).
- Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
