Micro-array de unidades de crónicos In vivo Grabación: Tetrodo Asamblea
Summary
En este protocolo, se muestra cómo fabricar y tetrodos condición para su uso con una amplia micro-drive, que fue diseñado para la crónica registros electrofisiológicos en las ratas. Además, se ilustran las etapas finales de construcción de micro-array de unidad, que incluye la instalación de cables de tierra y un cono de protección.
Abstract
El tetrodo, un paquete de cuatro electrodos, ha demostrado ser una valiosa herramienta para la grabación simultánea de múltiples neuronas in vivo. La amplitud de la diferencia de las firmas del potencial de acción sobre los canales de un tetrodo permite el aislamiento de la actividad de una sola unidad de las señales de múltiples unidades. La capacidad de controlar con precisión la localización estereotáxica y la profundidad de la tetrodo es fundamental para el estudio de la actividad neuronal coordinada en todas las regiones del cerebro. En combinación con un array de micro-, es posible lograr una colocación precisa y un control estable de tetrodos muchos a lo largo de días o semanas. En este protocolo, se demuestra cómo fabricar y tetrodos condición usando las herramientas básicas y materiales, instalar el tetrodos en una matriz de tetrodo de varias unidades de las enfermedades crónicas en vivo la grabación en la rata, hacer conexiones cable a tierra a la matriz de micro-drive, y colocar un cono de protección en serie de la unidad de micro-con el fin de proteger a los tetrodos de contacto físico con el medio ambiente.
Protocol
Discussion
Este protocolo es la segunda entrega de un protocolo de dos partes: "Micro-array de unidades de las enfermedades crónicas en vivo la grabación." La combinación de la matriz de la unidad de micro-y tetrodo es una poderosa herramienta para la obtención de registros simultáneos de muchas neuronas en una vigilia, comporta la preparación de los animales. Esperemos que le hemos proporcionado toda la información necesaria para que usted tendrá que iniciar o mejorar los registros electrofisiológicos en su pro…
Acknowledgements
Nos gustaría agradecer junio Yamamoto por su diseño y construcción del dispositivo automático, motor tornado tetrodo se muestra en el video. Además, nos gustaría agradecer a todos los miembros de Wilson pasado y el presente de laboratorio, por sus contribuciones a la micro-drive y el desarrollo de la tecnología tetrodo en el laboratorio.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Panavise | Tool | Panavise | Model 301 | Holds either micro-drive array or serrated scissors |
| Modified Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers. |
| Slow Cure Glue | Material | Great Planes (Champaign, IL) | GPMR6015 | To glue the tetrode to the micro-drive |
| Gold Plating Solution | Material | Neuralynx | Sifco Selectron Gold NC | Contains gold particles for electroplating |
| Current Generator | Tool | World Precision Instruments | A365D-B | A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips. |
| Impedance Meter | Tool | BAK Electronics | IMP-1 / 6662 / 2788 | To check impedance of electrodes |
| Hot Air Gun | Tool | Steinel (Germany) | HG 3002 LCD | To fuse electrodes together to make tetrode |
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (Ann Arbor, MI) | 18768 (Pattern 304) | For handling tetrodes |
| Alligator Clip | Tool | Fine Science Tools | 18050-35 | A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments | 25-1000 | For general cutting of tetrode/electrode wire |
| Iris Toughcut Serrated Scissors | Tool | Fine Science Tools | 14058-09 | For final cut of tetrodes |
| Teflon Coated Stainless Steel Wire | Material | A-M Systems (Carlsborg, WA) | 790500 | Ground wire |
| 12.5 micron nichrome wire | Material | Kanthal Palm Coast | Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING | Polyimide coated micro-wire for making tetrodes. |
| Tetrode Twister | Tool | Neuralynx | Tetrode Assembly Station | Increases the speed and consistency of tetrode fabrication. |
| Silver Paint | Material | GC Electronics | 22-023 | For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion) |
| X-Acto Knife Handle | Material | MSC Direct | X3001 | For constructing a micro-drive holding device. |
| 26 Pin, 2 Row Connector | Material | Mill-max | 852-10-026-30-001000 | For constructing a micro-drive holding device. |
Riferimenti
- Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
