Gibberella zeae Ascospore माइक्रोएरे प्रयोगों के लिए उत्पादन और संग्रह.
Summary
बाँझ शर्तों के तहत Gibberella zeae, संग्रह के लिए एक प्रक्रिया में ascospores के विकास की प्रक्रिया का अध्ययन करने के लिए आदेश में प्रोटोकॉल विवरण के लिए जानकारी का उच्चतम स्तर उत्पन्न फिल्माया है. यह प्रयोग, एक महत्वपूर्ण पहलू है जब पूर्ण जीनोम अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल परीक्षण लागू कर रहे हैं के reproducibility की सुविधा चाहिए.
Abstract
Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) एक संयंत्र रोगज़नक़ गेहूं और जौ कि फसल की उपज और अनाज की गुणवत्ता को कम कर देता है पर पपड़ी रोग के कारण है. एफ graminearum भी मक्के का डंठल और कान rots का कारण बनता है और trichothecenes कि अनाज दूषित और मनुष्यों और पशुओं (गोस्वामी और Kistler, 2004) के लिए हानिकारक हैं जैसे mycotoxins के एक निर्माता है. कवक spores के दो प्रकार के उत्पादन करता है. Ascospores, प्रजनक, यौन प्रजनन से उत्पन्न प्राथमिक संक्रमण का मुख्य स्रोत हैं. ये spores जबरन परिपक्व perithecia से छुट्टी कर रहे हैं और हवा (+१,९९९ Francl एट अल) के द्वारा छितरी हुई है. माध्यमिक संक्रमण मुख्य रूप से macroconidia जो संयंत्र सतह पर अलैंगिक मतलब द्वारा उत्पादित कर रहे हैं की वजह से कर रहे हैं. इस कवक में ascospores के विकास की प्रक्रिया का अध्ययन करने के लिए, बाँझ शर्तों के तहत बड़ी मात्रा में अपने संग्रह के लिए एक प्रक्रिया की आवश्यकता थी. हमारी प्रोटोकॉल क्रम में करने के लिए समझ और reproducibility के लिए जानकारी का उच्चतम स्तर उत्पन्न फिल्माया गया था, महत्वपूर्ण पहलुओं जब पूर्ण जीनोम जीन की अभिव्यक्ति प्रोफाइल उत्पन्न होते हैं और व्याख्या. विशेष रूप से, ascospore अंकुरण और जैविक गतिविधि की परिवर्तनशीलता सामग्री की पूर्व हेरफेर पर निर्भर हैं. ascospore उत्पादन में हर कदम का दस्तावेजीकरण करने के लिए वीडियो का उपयोग क्रम में मानकीकरण में वृद्धि का प्रस्ताव है, माइक्रोएरे विश्लेषण के लिए तेजी से कड़े आवश्यकताओं के साथ पालन. प्रक्रिया केवल मानक प्रयोगशाला उपकरणों की आवश्यकता है. चरण संदूषण और एहसान ascospores के समय तुल्यकालन को रोकने के लिए दिखाए जाते हैं.
Protocol
Discussion
यहाँ प्रस्तुत प्रोटोकॉल पिछले Fusarium एसपीपी के लिए perithecial उत्पादन के लिए प्रयोग किया जाता प्रक्रियाओं पर आधारित है. (Klittich और Leslie, 1988, ट्रेल और 2000 के आम,). प्रक्रिया है जिसके द्वारा ascospores (माइक्रोएरे विश्लेषण के लिए पर्याप्त…
Acknowledgements
लेखकों और उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए करेन Hilburn धन्यवाद. इस परियोजना के USDA सहकारी राज्य अनुसंधान, शिक्षा और विस्तार सेवा (2004-35604-14327 # पुरस्कार) के राष्ट्रीय अनुसंधान पहल द्वारा समर्थित किया गया था. Matias Pasquali ब्रैंको Weiss फैलोशिप द्वारा समर्थित है. अमेरिकी गेहूं और जौ पपड़ी पहल भी अनुसंधान के सतत समर्थन के लिए स्वीकार किया है.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri dish 9 cm Diameter | Tool | |||
| Tween 60 (20%) | Reagent | |||
| Carrot agar (20% w/v organic carrots and 1.5% w/v agar) | Reagent |
Riferimenti
- Beyer, M., Verreet, J. A., Francl, L., Shaner, G., Bergstrom, G., Gilbert, J., Pedersen, W., Dill-Macky, R., Sweets, L., Corwin, B., Jin, Y., Gallenberg, D., Wiersma, J., Goswami, R. S., Kistler, H. C., Klittich, C. J. R., Leslie, J. F., Trail, F., Common, R., Tschantz, A. T., Horst, R. L., Nelson, P. E., Tschanz, A. T., Horst, R. K., Nelson, P. E. Germination of Gibberella zeae ascospores as affected by age of spores after discharge and environmental factors. Genetica. 118, 417-2013 (2005).
