我々はアメリカのロブスターの胃から口胃神経系の微細な解剖を説明します(<i>ロブスター属americanus</i>)。
どのように神経系の活動を生産し、環境への対応を理解することを目標に、神経科学者が関心の活性を発揮し、アクセス可能と実験的手法に従順なモデルシステムに電源を入れます。アメリカンロブスターの口胃神経系(STNS)(<i>ロブスター属americanus</i>、また大西洋またはメインロブスターでした)知っているネットワークとネットワークの神経調節を生成するリズムを研究するためのモデルシステムとして確立されている。 STNSは、そのプロジェクトの一元口と胃の神経節(STG)に調節ニューロンを含む、3前核(2交連神経節と食道神経節)で構成されています。 STGは2つの中枢パターン生成ネットワークを構成する約30ニューロン、甲殻類の摂食行動の根底にある幽門と胃のネットワークが含まれています<sup> 1,2</sup>。それはこのシステムを研究することは可能ですが、<i> in vivoで</i<sup> 3</sup>、STNSが孤立したとき、そのリズム活動を生み出し続ける<i> in vitroで</i>。皿のSTNSの物理的な分離は、細胞内の電気生理学的記録のための神経のsomaの複数形にし、細胞外記録用STNSの神経へ簡単にアクセスすることができます。 STNSを分離すると、2つのプロセスです。動物からの胃を解剖最初の部分は、付属のビデオ資料に記載されています。<sup> 4</sup>。このビデオの記事では、微細な解剖の技術は、胃からSTNSを分離するために使用されています。この手順では、電気生理学的記録に使用できる神経系の準備をもたらす。
ロブスターの胃とSTNSの解剖学は、よく以前に5,6に記載されており、この解剖の手順のバリエーションが多くの研究に利用されている。我々は、開始前に、解剖に5-7とSTNS 5,8胃の解剖学に精通することをお勧めします。そのような知識が神経や組織への偶発的な損傷のリスクを減少します。
準備の健康を維持するために、それは涼しい温度で準備を維持するために重要です。これは、簡単に生理食塩水を4と30分毎に交換することによって達成される˚C生理食塩水は冷蔵庫で保管。冷生理食塩水に浸漬する場合、孤立STNSの準備は、多くの時間実行可能です。関連ロブスター属のヨコエビの録音は 、in vitro 9 の 5日間を通してSTGから安定したリズム活動を示している。類似の堅牢性は、H.で見られているamericanus(OBS pers.。)。
交連神経節からSTGへの調節の入力は、継続的な運動パターンを維持するために必要です。したがって、正常なリズム活動を維持するために、これらの神経節とイオン 、 息子 、とSTNの神経はそのまま保持されている必要があります。 AGNの(胃ミル(GM)軸索を含む)、MVNの(ラテラル胃(LG)と劣った心臓(IC)軸索を含む)、pyn S:我々が説明する解剖では、いくつかの運動神経を(運動ニューロン軸索を含む)保持(幽門ニューロン(PY)軸索を含む)、PDNの(幽門拡張器(PD)軸索を含む)、とLVNの(ラテラル幽門(LP)、内側胃(MG)、LPGの軸索だけでなく、GMからのものを含む、 PDとPY)。追加の(または別の)神経を解剖することにより、他の運動ニューロンの軸索が記録されることがあります。運動ニューロン軸索のそれぞれの個々のタイプは、ニューロンのプロジェクトの、そのタイプに筋肉を支配する神経から解剖し、記録することによって個々に記録することができる。
この製剤は、神経系の機能に焦点を当てた研究のさまざまな目的で使用されることがあります。ニューロンの活動はsomaの複数形や軸索から細胞内、シャープ電極記録を用いて、または神経から細胞外に電気インパルスを記録することによって、どちらか記録することができる。 STGニューロンの多くのイオンチャネルは、部分的にクローニングされており、mRNAは、手動で引っ張らsomaの複数形10,11から測定することができる。
我々は、顧問、博士イヴマーダーに感謝します。この研究は、イブマーダーとNS059255にNS17813 AE T.する健康補助金の国立研究所によってサポートされていました
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Tool | California Fine Wire | Cut into 1-2mm pieces to use as fine pins. | |
Forceps #5 | Tool | FST | 91150-20 | |
Minuten Pins | Tool | FST | 26002-10 | |
Moria Spring Scissors (7mm blades) | Tool | FST | 15370-52 | These are the top of the line. There are more economical spring scissors available from the same company. |
Petri Dish (100x15mm) | Tool | Fischer | 08-757-12 | Fill 2-4mm with Sylgard 182. |
Sylgard 182 | Altro | Dow Corning | 182 | |
Pin Holder | Tool | FST | 26018-17 | Optional. Desheathing can be done with scissors and fine forceps alone. |
Super fine forceps #5SF | Tool | FST | 11252-00 | |
Tungsten Needles | Tool | FST | 10130-05 | Optional. Desheathing can be done with scissors or with pins cut from fine tungsten wire. |
Dissection microscope |