Kanker Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection
Summary
Het stomatogastric zenuwstelsel (STNS) van de Jona krab (<em> C. borealis</em>) Kan worden gebruikt voor de elektrofysiologie, immunohistochemie, en onderzoeken in celculturen. De STNS extractie gebeurt in twee delen: de grove en fijne dissectie.
Abstract
De stomatogastric ganglion (STG) is een uitstekend model voor het bestuderen van cellulaire en interactie met het netwerk, want het bevat een relatief klein aantal cellen (ongeveer 25 in C. borealis) die goed worden gekarakteriseerd. De cellen in de STG vertonen een breed scala aan uitgangen en zijn verantwoordelijk voor de motorische acties van de maag. De maag bevat de maag molen die voedsel afbreekt met drie interne tanden, en de pylorus, die het voedsel filtert voordat het de middendarm. De STG produceert twee ritmische uitgangen naar de maag molen en pylorus bekend staat als centrale patroon generatoren (CPGs) controle. Elke cel in het STG kunnen deelnemen aan een of beide van deze ritmes. Deze CPGs maken voor de studie van neuromodulatie, homeostase, cellulair en netwerk variabiliteit, netwerk ontwikkeling en net te herstellen.
De dissectie van de stomatogastric zenuwstelsel (STNS) van de Jona Noordzeekrab (Cancer borealis) gebeurt in twee delen, de grove en fijne dissectie. In de bruto-dissectie de gehele maag wordt ontleed uit de krab. Tijdens de fijne dissectie van de STNS wordt gewonnen uit de maag met behulp van een dissectie microscoop en micro-dissectie-instrumenten (zie figuur 1). De STNS omvat de STG, de slokdarm ganglion (OG), en de commissural ganglia (COG) en de zenuwen die de maag spieren innerveren. Hier laten we zien hoe een volledige ontleding van de STNS ter voorbereiding van een elektrofysiologie experiment waarbij de cellen in de STG zou worden opgenomen van intracellulair en de perifere zenuwen uit te voeren zou worden gebruikt voor extracellulaire opnamen. De juiste techniek voor het vinden van de gewenste zenuwen is zowel getoond als onze techniek van desheathing het ganglion aan de somata en neuropil onthullen.
Protocol
Discussion
De STNS dissectie is de eerste stap in het uitvoeren van een elektrofysiologie of immunohistochemie experiment, of voor het verkrijgen van cellen voor celcultuur. Ongeacht de beoogde experiment, zal de bruto dissectie blijven ongewijzigd. Echter, de fijne dissectie variëren. Het is belangrijk om van tevoren te plannen welke cellen en welke zenuwen je zult opnemen. De meeste neuronen in de STG hebben processen die ten minste een spier innerveren in de maag (zie figuur 2) en zijn ingedeeld volgens hun geïnnerveerd doel….
Acknowledgements
Wij dankbaar erkennen de leden van de Marder Lab. Wij danken onze adviseur, dr. Eva Marder, voor haar steun en aanmoediging. Dit onderzoek werd ondersteund door het Nationaal Instituut voor Neurologische Aandoeningen en Stroke subsidies NS-17813 en de NS-058110.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Black Sylgard 170 | Altro | Dow Corning | 170 | Gross Dissection |
| Fine Scissors | Surgery | FST | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Surgery | FST | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | Surgery | FST | 14110-17 | |
| Micro-Spatula | Surgery | Ward Sci. | 15 V 4313 | |
| Rongeurs | Surgery | FST | 16000-14 | |
| Tissue Forceps | Surgery | FST | 11021-12 | |
| Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Surgery | California Fine Wire | Fine Dissection | |
| Forceps #5 | Surgery | FST | 91150-20 | |
| Minuten Pins | Surgery | FST | 26002-10 | |
| Moria Spring Scissors (7mm blades) | Surgery | FST | 15370-52 | |
| Petri Dish (100x15mm) | Altro | Fischer | 08-757-12 | |
| Pin Holder | Surgery | FST | 26018-17 | |
| Super fine forceps #5SF | Surgery | FST | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | Altro | Dow Corning | 182 | |
| Tungsten Needles | Surgery | FST | 10130-05 | |
| Dissecting Microscope | Microscope | Wild | MC3 | Misc. |
| Jonah Crab (C. borealis) | Animal | Commercial Lobster |
Riferimenti
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. . Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).
- Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network. Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).
