Il sistema nervoso stomatogastric (STNS) del granchio Giona ( C. Borealis) Può essere utilizzato per elettrofisiologia, immunoistochimica, e studi su colture cellulari. L'estrazione STNS avviene in due parti: la dissezione lordo e fine.
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Articolo metodologico
Cancro Borealis Stomatogastric dissezione del Sistema Nervoso
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il ganglio stomatogastric (STG) è un modello eccellente per studiare le interazioni cellulari e di rete, perché contiene un numero relativamente piccolo di cellule (circa 25 in C. borealis) che sono ben caratterizzati. Le cellule del STG mostra una vasta gamma di uscite e sono responsabili delle azioni motorie dello stomaco. Lo stomaco contiene il mulino gastrico che scompone il cibo con tre denti interni, e il piloro che filtra il cibo prima che raggiunga il midgut. La STG produce due uscite ritmica per controllare il mulino gastrica e piloro conosciuto come generatori di pattern centrali (CPG). Ogni cella della STG possono partecipare a uno o entrambi questi ritmi. Queste CPGs permettono per lo studio della neuromodulazione, omeostasi, la variabilità cellulare e di rete, sviluppo della rete, e il recupero della rete.
La dissezione del sistema nervoso stomatogastric (STNS) dal granchio Giona (Cancer borealis) è fatto in due parti: la dissezione lordo e fine. Nella dissezione lordo stomaco intero sezionato dal granchio. Durante la dissezione bene il STNS viene estratto dallo stomaco utilizzando un microscopio dissezione e micro-dissezione strumenti (vedi figura 1). Il STNS comprende la STG, il ganglio esofageo (OG), ed i gangli commissurali (COG) così come i nervi che innervano i muscoli dello stomaco. Qui mostriamo come eseguire una dissezione completa del STNS in preparazione per un esperimento di elettrofisiologia in cui le cellule del STG sarebbe registrato da cellule ed i nervi periferici sarebbe stato utilizzato per le registrazioni extracellulari. La tecnica corretta per trovare i nervi desiderata è mostrata così come la nostra tecnica di desheathing ganglio di rivelare la somata e neuropilo.
Protocollo
1. Dissezione lordo
- Posizionare un granchio in ghiaccio per 30 minuti opachi i sistemi sensoriali e motorie dell'animale. Lo circondano su tutti i lati con ghiaccio. I guanti dovrebbero essere indossati quando si maneggia il granchio.
- Preparati per la dissezione lordo ponendo la pentola dissezione e gli strumenti si intende utilizzare. Rongeurs, osso taglio forbici, forbicine, pinzette dentate, una spatola con un bordo affusolato, un nero Sylgard rivestita piatto, e perni insetti sono necessari.
- Rimuovere il granchio dal secchiello del ghiaccio per la sua zampa posteriore per evitare che pizzicotti e metterla nella padella dissezion....
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Discussione
La dissezione STNS è il primo passo per l'esecuzione di un esperimento o di elettrofisiologia immunoistochimica, o per l'ottenimento di cellule per la coltura cellulare. Indipendentemente l'esperimento previsto, la dissezione lordo rimarrà invariato. Tuttavia, la dissezione multa può variare. E 'importante pianificare in anticipo del tempo che cellule e nervi che si registra da. La maggior parte dei neuroni nel STG sono processi che innervano almeno un muscolo nello stomaco (vedi figura 2) e sono classif.......
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Ringraziamenti
Noi riconosciamo con gratitudine i membri del Laboratorio Marder. Ringraziamo il nostro consulente, il dottor Eve Marder, per il suo sostegno e incoraggiamento. Questa ricerca è stata finanziata dal National Institute of Neurological Disorder and Stroke Grants NS-NS-17.813 e 058.110.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti | |
|---|---|---|---|---|
| Sylgard nero 170 | Altro | Dow Corning | 170 | Dissezione grossolana |
| Forbici fini | Chirurgia | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Puntine per insetti misura 6 | Chirurgia | Fine Science Tools | 26000-65 | |
| Forbici Mayo | Chirurgia | Fine Science Tools | 14110-17 | |
| Microspatola | Chirurgia | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | |
| Fratturatore osseo (rongeurs) | Chirurgia | Fine Science Tools | 16000-14 | |
| Pinze per tessuti | Chirurgia | Fine Science Tools | 11021-12 | |
| Filo fine di tungsteno (diametro 0,001 in) | Chirurgia | California Fine Wire Company | Dissezione fine | |
| Pinze n. 5 | Chirurgia | Fine Science Tools | 91150-20 | |
| Puntine minutine | Chirurgia | Fine Science Tools | 26002-10 | |
| Forbici a molla Moria (lame da 7 mm) | Chirurgia | Fine Science Tools | 15370-52 | |
| Piatto di Petri (100x15 mm) | Altro | Fisher Scientific | 08-757-12 | |
| Portapuntine | Chirurgia | Fine Science Tools | 26018-17 | |
| Pinze superfini n. 5SF | Chirurgia | Fine Science Tools | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | Altro | Dow Corning | 182 | |
| Aghi di tungsteno | Chirurgia | Fine Science Tools | 10130-05 | |
| Microscopio stereoscopico | Microscopio | Wild | MC3 | Varie |
| Granchio Jonah (C. borealis) | Animale | Commercial Lobster |
Riferimenti
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , MIT Press. Boston. (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs.<....
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Ristampe e permessi
