מה שחשוב לדעת: Stereology משוחדת במוח שאינם האדם הפרימאטים
Summary
הארגון האנטומי של המוח הפרימטים יכול לספק תובנות חשובות בתנאים נורמליים ופתולוגיים אצל בני אדם. Stereology משוחדת היא שיטה מדויקת ויעילה לאמוד את מספר נוירון הכולל (או סוג תא אחר) בחלל התייחסות נתונה<sup> 1</sup>.
Abstract
פרימטים שאינם בני אדם היא מין translational חשובים להבנת תפקוד נורמלי ומחלות תהליכים של המוח האנושי. Stereology משוחדת, השיטה המקובלת המדינה-of-the-art עבור כימות של אובייקטים ביולוגיים בסעיפים רקמה<sup> 2</sup>, מייצר נתונים אמין עבור תכונות מבניות ביולוגי במוח של יונקים<sup> 3</sup>. רכיבי מפתח של הגישה הם משוחדת (שיטתית אקראית) הדגימה של מבנים המוגדרים מבחינה אנטומית (רווחים הפניה), בשילוב עם כימות של מספרים סלולריים, גודל סיבים נימי אורכי, שטח פנים, נפח האזורי הפצות המרחבי של אובייקטים ביולוגיים בתוך התייחסות בחלל<sup> 4</sup>. בין היתרונות של גישות אלו stereological על פני שיטות קודמות הוא ההימנעות של כל המקורות הידועים של טעות שיטתית (לא אקראית) הנובעים מהנחות פגום ולא לאימות מודלים. מחקר זה מסמכים יישום הביולוגי של stereology ממוחשב כדי להעריך את סך האוכלוסייה נוירונים בקליפת המוח הקדמית של המוח הקוף vervet (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>), בסיוע שתי תוכניות stereology זמינים מסחרית, מדעי החיים ו BioQuant Stereologer (איור 1). בנוסף בניגוד והשוואה של תוצאות BioQuant והן<em> Stereologer</em> מערכות, מחקר זה מספק פרוטוקול מפורט עבור<em> Stereologer</em> המערכת.
Protocol
Discussion
Stereology משוחדת במוח קוף דומה לזה של דגימות ביולוגיות אחרות. עם זאת, בהתחשב בגודל של המוח הפרימטים, תוכנית עיבוד זהיר מומלץ מאז חצי כדור יחיד של הקוף vervet תשואות יותר מ 1200 חלקים כאשר פרוס על 50μm. ראשית אנו ממליצים stereotaxically חוסמים את המוח לגושים 1cm, המספק מטוס סטנדרטי סעיף בי?…
Acknowledgements
המחברים מבקשים להודות Ikiel Ptito לקבלת תמיכה טכנית המשיכה שלו. NSERC להעניק MP.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereologer | Stereology Resource Center (Chester, MD) | www.disector.com | ||
| Stereology Tool-Kit Stereologer system | BioQuant Life Sciences (Nashville, TN) | |||
| StereoInvestigator | MicroBright Field (Willston, VT) |
Riferimenti
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Saper, C. B. Any way you cut it: a new journal policy for the use of unbiased counting methods. J Comp Neurol. 364, 5-5 (1996).
- Sterio, D. C. The unbiased estimation of number and sizes of arbitrary particles using the disector. J Microsc. 134, 127-136 (1984).
- Mouton, P. R. . Principles and Practices of Unbiased Stereology. , (2002).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the non-human primate brain in stereotaxic space. J Vis Exp. 29, (2009).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Brain banking: Making the most of your research. J Vis Exp. 29, (2009).
- Manaye, K. F., Wang, P., O’Neil, J., Huafu, S., Tizabi, Y., Thompson, N., Ottinger, M. A., Ingram, D. K., Mouton, P. R. Neuropathological Quantification Of Dtg APP/PS1: Neuroimaging, Stereology, And Biochemistry. AGE. 29, 87-96 (2009).
- Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
- Zangenehpour, S., Burke, M. W., Chaudhuri, A., Ptito, M. Batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain. J Vis Exp. 29, (2009).
