Maus Adrenal Chromaffin Zellisolation

Summary

Nebennierenmarks chromaffinen Zellkultur-Systeme sind äußerst nützlich für die Untersuchung der Anregungs-Sekretion Kopplung in einem in vitro-Einstellung. Dieses Protokoll stellt das Verfahren verwendet werden, um den Nebennieren zu sezieren und dann isolieren medulläre Region durch Abstreifen der Nebennierenrinde. Die Verdauung der Medulla in einzelne chromaffinen Zellen wird dann demonstriert.

Abstract

Nebennierenmarks chromaffinen Zellkultur-Systeme sind äußerst nützlich für die Untersuchung der Anregungs-Sekretion Kopplung in einem in vitro-Einstellung. Dieses Protokoll stellt das Verfahren verwendet werden, um den Nebennieren zu sezieren und dann isolieren medulläre Region durch Abstreifen der Nebennierenrinde. Die Verdauung der Medulla in einzelne chromaffinen Zellen wird dann demonstriert.

Protocol

Abkürzungen: ACC – Adrenal chromaffinen Zellen, E. Soln – Enzymlösung, E. DMEM – Enriched Dulbeccos Modified Eagle Medium Vorbereitung Add Papain auf die gewünschte Menge an E. Soln (40 Einheiten Papain / 1ml E. Soln.). Aktivieren Papain mit Carbogen für etwa 15 Minuten auf dem Eis. Oxygenat Lockes Puffer auf Eis als auch. Zergliederung <l…