Ratón cromafín aislamiento de células

Summary

Médula suprarrenal cromafines sistemas de cultivos celulares son muy útiles para el estudio del acoplamiento excitación-secreción en el establecimiento in vitro. Este protocolo se ilustra el método utilizado para diseccionar las glándulas suprarrenales y luego aislar a la región medular al eliminar la corteza suprarrenal. La digestión de la médula en una sola las células cromafines se demostró entonces.

Abstract

Médula suprarrenal cromafines sistemas de cultivos celulares son muy útiles para el estudio del acoplamiento excitación-secreción en el establecimiento in vitro. Este protocolo se ilustra el método utilizado para diseccionar las glándulas suprarrenales y luego aislar a la región medular al eliminar la corteza suprarrenal. La digestión de la médula en una sola las células cromafines se demostró entonces.

Protocol

Abreviaturas: ACC – adrenal de células cromafines, E. sol. – solución de la enzima, E. DMEM – Modificado enriquecido Dulbecco Medio Eagle Preparación Añadir la papaína a la cantidad deseada de E. sol. (40 unidades de papaína / 1 ml E. sol.).. Activar la papaína con carbogen durante unos 15 minutos en hielo. Buffer oxigenar de Locke sobre el hielo también. <span class="j…