Topo surrenale cromaffini cella di isolamento

Summary

Midollare surrenale cromaffini sistemi di colture cellulari sono estremamente utili per lo studio della secrezione di accoppiamento eccitazione-in un ambiente in vitro. Questo protocollo illustra il metodo utilizzato per analizzare le ghiandole surrenali e quindi isolare la regione midollare strappando via la corteccia surrenale. La digestione del midollo in singole cellule cromaffini è poi dimostrato.

Abstract

Midollare surrenale cromaffini sistemi di colture cellulari sono estremamente utili per lo studio della secrezione di accoppiamento eccitazione-in un ambiente in vitro. Questo protocollo illustra il metodo utilizzato per analizzare le ghiandole surrenali e quindi isolare la regione midollare strappando via la corteccia surrenale. La digestione del midollo in singole cellule cromaffini è poi dimostrato.

Protocol

Abbreviazioni: ACC – surrenale cellule cromaffini, E. Soln – soluzione enzimatica, E. DMEM – Arricchito Dulbecco modificato Aquila Media Preparazione Aggiungi alla papaina quantità desiderata di E. Soln (40 unità papaina / 1ml E. Soln.). Attivare la papaina con CarboGen per circa 15 minuti in ghiaccio. Buffer di ossigenare di Locke sul ghiaccio pure. D…