Midollare surrenale cromaffini sistemi di colture cellulari sono estremamente utili per lo studio della secrezione di accoppiamento eccitazione-in un ambiente in vitro. Questo protocollo illustra il metodo utilizzato per analizzare le ghiandole surrenali e quindi isolare la regione midollare strappando via la corteccia surrenale. La digestione del midollo in singole cellule cromaffini è poi dimostrato.
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Articolo metodologico
Topo surrenale cromaffini cella di isolamento
In questo articolo
Sommario
Abstract
Midollare surrenale cromaffini sistemi di colture cellulari sono estremamente utili per lo studio della secrezione di accoppiamento eccitazione-in un ambiente in vitro. Questo protocollo illustra il metodo utilizzato per analizzare le ghiandole surrenali e quindi isolare la regione midollare strappando via la corteccia surrenale. La digestione del midollo in singole cellule cromaffini è poi dimostrato.
Protocollo
Abbreviazioni:
ACC - surrenale cellule cromaffini, E. Soln - soluzione enzimatica, E. DMEM - Arricchito Dulbecco modificato Aquila Media
- Preparazione
- Aggiungi alla papaina quantità desiderata di E. Soln (40 unità papaina / 1ml E. Soln.).
- Attivare la papaina con CarboGen per circa 15 minuti in ghiaccio. Buffer di ossigenare di Locke sul ghiaccio pure.
- Dissezione
- Utilizzare il mouse 8-10 settimana.
- Prima di rimuovere la digestione ossigenato tampone di Locke e posto sul ghiacci....
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