Этот метод выставляет neuromusculature дрозофилы эмбриональных для иммуногистохимии или электрофизиологические записи. Это полезно для изучения ранних событий в нервно-мышечной развития или при выполнении электрофизиологии в мутантов, которые не могут люк.
Дрозофилы является одним из ведущих генетических модель для изучения как эмбриональное развитие и функциональные нейронауки. Традиционно, эти поля достаточно изолированы друг от друга, причем в значительной степени независимых историй и научных сообществ. Тем не менее, взаимодействие между этими обычно разрозненных полей программ развития основных функциональных приобретение электрической сигнализации свойства и дифференциация функциональных синапсов химических во время финальной фазы нейронных формирование контура. Этот интерфейс является критически важной областью для исследований. У дрозофилы, эти фазы функционального развития происходят в течение периода <8 часов (при 25 ° С) в течение последней трети эмбриогенеза. Это поздний период развития, был долгое время считались неразрешимыми для расследования из-за отложения жесткой, непроницаемой эпидермальный кутикулы. Прорыв продвижение было применение воды полимеризации хирургического клея, которые могут быть применены к локально кутикулы чтобы контролируемые рассечение поздней стадии эмбрионов. С спинного продольного разреза, эмбрион может быть в горизонтальном положении, выставляя брюшной нервной и мускулатуры стенки тела в экспериментальном исследовании. Эта система была активно используется, чтобы изолировать и охарактеризовать генетических мутантов, которые препятствуют образованию эмбриональных синапса, и таким образом выявить молекулярные механизмы, регулирующие спецификации и дифференциации синапсов соединений и функциональных свойств синаптической сигнализации.
Точная постановка эмбрионов является критическим из-за быстрого созревания функциональных свойств с течением времени хода всего несколько часов. Несколько вопросов, усложняют эту постановку. Во-первых, большинство исследователей использовать приурочен яйца откладывает на стадии эм…
КБ поддерживается NIH грант GM54544.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Embryo Collection Cages | Genesee Scientific (www.flystuff.com) | 59-100 (for 60 mm dish; other sizes available) | Cages can also be home made using punctured tri-pour beakers, as shown in video | |
Sylgard 184 | Dow Corning | Available from various companies | Surgical glue adheres better to sylgard-coated coverslips | |
Fine glass tubing, outer diameter 1.0-1.5 mm | various | For pulling into fine glass needles for dissection and tubes for glue delivery | ||
Plastic tubing, to attach to glass pipette for mouth suction and glue application | Tygon | Tubing inner diameter needs to match glass outer diameter. |