में vivo Ca 2 + - हनी बी में घ्राण सीखना दौरान मशरूम शारीरिक न्यूरॉन्स की इमेजिंग
Summary
मधुमक्खियों का एक appetitive घ्राण सीखने प्रतिमान (प्रति कंडीशनिंग) में वातानुकूलित किया जा सकता है है. उत्तेजनाओं के रूप में odors के उपयोग, हम एक विधि है जो व्यवहार में दर्ज की गई है जबकि एक साथ कैल्शियम इमेजिंग मशरूम शरीर के न्यूरॉन्स में गंध पैदा गतिविधि को मापने के लिए प्रयोग किया जाता है की स्थापना की<em> Vivo में</em>.
Abstract
vivo और सेमीफाइनल में कैल्शियम इमेजिंग के लिए vivo तैयारी Joerges Küttner, और Galizia द्वारा हमारी प्रयोगशाला में विकसित किया गया है पर दस साल पहले, antennal 1 पालि में गंध पैदा गतिविधि को मापने के लिए. तब से यह लगातार परिष्कृत किया गया है और मधुमक्खी मस्तिष्क में अलग neuropiles के लिए लागू है. यहाँ, हम वर्तमान में प्रयोगशाला में प्रयोग किया जाता मशरूम शरीर dextran कैल्शियम के प्रति संवेदनशील डाई युग्मित (Fura-2) का उपयोग न्यूरॉन्स में गतिविधि को मापने की तैयारी का वर्णन. हम retrogradely उनके axons या सोम क्षेत्र में डाई के इंजेक्शन लगाने के द्वारा मशरूम शरीर न्यूरॉन्स दाग. हम invasiveness कम करने पर ध्यान केंद्रित करने के लिए एक तैयारी है जिसमें यह अभी भी संभव कंडीशनिंग प्रतिशत का उपयोग मधुमक्खी ट्रेन हासिल. हम निगरानी और मांसपेशियों जो प्रतिशत दो (M17) नियंत्रण से विद्युत myograms रिकॉर्डिंग से व्यवहार प्रतिक्रिया यों कर रहे हैं .
शारीरिक प्रयोग imaged संरचनाओं के बाद अधिक से अधिक confocal स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी का उपयोग करने के लिए न्यूरॉन्स की पहचान का पता के विस्तार में जांच कर रहे हैं.
Protocol
Discussion
इस प्रस्तुति में हम सभी चरणों के माध्यम से चले गए मधुप में vivo कैल्शियम संकेतों में जांच करने के लिए. हम मशरूम शरीर के न्यूरॉन्स के लिए इस तकनीक लागू है, लेकिन इमेजिंग सभी न्यूरॉन्स, जो के लिए एक धुं?…
Acknowledgements
इस काम DFG के द्वारा वित्त पोषित है.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| low melting point hard wax Deiberit 502 | Dr. Böhme & Schöps Dental GmbH | |||
| FURA-2 dextran potassium salt, 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | F-3029 | Protect from light. | |
| tetramethylrhodamine dextran 10 000 MW | Invitrogen/Molecular Probes | D-3312 | Protect from light. | |
| n-eicosane | Sigma-Aldrich | 21, 927-4 | ||
| Kwik Sil Adhesive | WPI | KWIK SIL | ||
| Imaging Set-up | TILL Photonics | |||
| CCD camera | Imago | |||
| CED | Texas Instruments |
Riferimenti
- Joerges, J., Küttner, A., Galizia, C. G., Menzel, R. Representations of odors and odor mixtures visualized in the honeybee brain. Nature. 387 (6630), 285-288 (1997).
- Rehder, V. Quantification of the honeybee’s proboscis reflex by electromyiographic recordings. J. Insect Physiol. 33, 501-507 (1987).
- Galizia, C. G., Vetter, R. S., Christensen, T. A. Optical Methods for Analyzing Odor-Evoked Activity in the Insect Brain. Methods in Insect Sensory Neuroscience. , 345-388 (2004).
- Mauelshagen, J. Neural correlates of olfactory learning paradigms in an identified neuron in the honeybee brain. J Neurophysiol. 69 (2), 609-625 (1993).
- Kuwabara, M. Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene Apis mellifica, Hokaido Univ. Zool. J. Sci. 13, 458-464 (1957).
- Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera. Journal of Comparative Psychology. 97 (2), 107-119 (1983).
