Пчелы могут быть обусловлены в аппетит обонятельных парадигмы обучения (PER кондиционирования). Использование запахов в качестве стимула, мы создали метод, в котором поведение записывается одновременно Кальций изображений используется для измерения запаха вызванную активность нейронов в грибном теле<em> В естественных условиях</em>.
Abstract
В естественных и полу-в естественных условиях подготовки к Кальций изображений был разработан в нашей лаборатории по Joerges, Каттнер и Galizia более десяти лет назад, для измерения запаха вызванной активности в усиков доли 1. С тех пор она постоянно изысканный и применительно к различным neuropiles у пчелы мозга. Здесь мы описываем подготовки в настоящее время используется в лаборатории для измерения активности нейронов в грибном тела с помощью декстран связан кальций-чувствительных красителя (Фура-2). Мы ретроградно пятно гриб нейронов тело путем введения красителя в их аксонов и сомы регионе. Мы делаем ставку на снижение инвазивности, для достижения подготовки, в которых он по-прежнему можно обучить пчел использованием PER кондиционирования. Мы в состоянии контролировать и количественно поведенческой реакции при записи электро-myograms из мышц, которая контролирует PER (М17) 2.
После физиологического эксперимента отображаемого структур исследованы более подробно с помощью конфокальной сканирующей микроскопии для решения личность нейронов.
Protocol
Би Подготовка и Back-заполнить Поймать фуражиров пчелиный мед в улей и охладить на льду для иммобилизации. Горы в оргстекла записи камер 3. Fix глаза и грудная клетка со стенками камеры записи с низкой температурой плавления твердым воском. Вытяните стеклянных капилл…
Discussion
В этой презентации мы прошли через все шаги для расследования в естественных сигналов кальция в медоносной пчелы. Мы применили этот метод для грибов нейронов тела, но изображение может быть сделано на всех нейронов, для которых техника окрашивания может быть установлено. Мы сосре?…
Haehnel, M., Froese, A., Menzel, R. In vivo Ca2+– Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee. J. Vis. Exp. (30), e1353, doi:10.3791/1353 (2009).