Summary

Horseshoe Yengeç kullanarak, Limulus Polyphemus'un Vizyon Araştırma

Published: July 03, 2009
doi:

Summary

Bu videoda, Amerikalı at nalı yengeci elektroretinogram kayıt, optik sinir kayıt ve intraretinal kayıt gerçekleştirmek<em> Limulus Polyphemus'un</em>. Bu elektrofizyolojik paradigmalar, bir araştırma veya öğretim laboratuvar görme nöral temeli soruşturma için kullanılabilir.

Abstract

Amerikan at nalı yengeci, Limulus Polyphemus'un, dünyanın en eski canlıların biridir ve hayvan biyomedikal araştırma vazgeçilmez bir rol oynamaya devam etmektedir . Onların kan değil, sadece bilim adamları ilaçların bacteriotoxins algılamak için kullandığı özel hücreler içeren, ama onların gözleri de ışık adaptasyon ve yanal inhibisyonu gibi fizyolojik süreçleri, görsel sistem faaliyet hakkında daha fazla fikir sağlanan bir sinir ağı yapar. At nalı yengeci, hayvan, büyük ve cesur bir omurgasız olduğundan, retinal nöronların büyük ve kolayca erişilebilir görme araştırma için çekici bir model olmaya devam ediyor, görme sistemi, kompakt ve yoğun çalışılan ve görsel davranış iyi tanımlanmıştır. Ayrıca, gözlerin yapısı ve fonksiyonu, hayvanın beyninde bir sirkadiyen saat bir günlük bazda modüle. Kısacası, at nalı yengeçleri görme sistemi yeterince basit ama ilginç olacak kadar karmaşık anlaşılmalıdır.

Bu video Limulus in vivo olarak yapılabilir görme nöral temelini araştırmak için üç elektrofizyolojik paradigmalar sunuyoruz. Onlar elektroretinogram kayıt, optik sinir kayıt ve intraretinal kayıt. Bir yüzeye sahip elektroretinografi (ERG) kayıtları tedbir, tüm hücreleri bir ışık yanıp sönmeye göz özetlenebilir elektriksel tepki elektrodudur. Onlar zaman uzatmak süreler için göz genel duyarlılığı izlemek için kullanılabilir. Optik sinir kayıtları ekstraselüler microsuction elektrot ile tek sinir liflerinin spike aktivitesini ölçmek. Göz, beyin gibi beyin göz geri beslenen sirkadiyen saat mesajları iletilir görsel mesajları okumak için kullanılabilir. Intrasellüler mikroelektrot İntraretinal kayıtları önlem voltaj dalgalanmaları göz bireysel hücrelerin ışık ile indüklenen. Onlar retina işleme hücresel mekanizmaları aydınlatmak için kullanılabilir.

Protocol

Bölüm 1: Deneysel Hazırlık At nalı yengeçleri üzerinde yapılan deneysel prosedürleri Boston Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır. Hayvanlar düzenlenmiş bir ışık-karanlık döngüsüne maruz kalan bir oda Deniz Biyoloji Laboratuarları (Woods Hole, MA) veya başka bir satıcı satın alınan ve gazlı bir tuzlu su tankı ev sahipliği yapmaktadır. Aydınlatma rejimi yengeç sirkadiyen saat sürükleyici ve gündüz ve gece devletle…

Discussion

Biz, ERG kayıtları, optik sinir kayıtları ve in vivo olarak at nalı yengeçleri intraretinal kayıtları nasıl gerçekleştirebileceğimizi gösterdi var. Kayıt teknikleri her nöral temeline ilişkin vizyon, farklı bakış açıları sağlamak ve hepsi yengeç büyük gözleri ve sert karapaksla canlı hayvanlar sayesinde retina fonksiyonunu incelemek için kullanılabilir. Optik sinir aktivitesi elektrot uygun inşaat (4) ile özgürce okyanus hayvanları davranmaya bile kaydedilebilir. Bu teknikler, aynı zam…

Acknowledgements

Yazarlar ile ona yardım için bu video makale üreten Dr. Birgit Werner kabul etmek istiyorum. Bu araştırma, bir NSF KARİYER Ödülü tarafından finanse edildi.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
LED Light source Newark Inc 33C1292  
Suction electrode Electrode A-M Systems, Inc 573000  
XCell 3*4-Channel Extracellular Amplifier Amplifier FHC Inc. 40-40-8B  
Intracellular Recording Amplifier Cygnus IR-283A  
APM Neural Spike Discriminator FHC Inc. APM  
Bits++ Video Board Cambridge Research Systems Inc Bits++  
Piezopatch Manipulator Micropositioner WPI Inc PPM5000  
Square Pulse Stimulator Nerve Stimulator Grass Instrument Division, Astro-Med, Inc. Model S48  
P-97 Micropipette Puller Sutter Instruments Model P-97  
Borosilicate Glass Capillary Electrode glass WPI Inc 1B150-4  
Horseshoe crab (Limulus polyphemus) Animal Marine Biological Laboratories    
Micropipette Puller Glass Puller Sutter Instruments P-97  
Zoom Stereoscope Microscope Jed Pella Inc. SMZ-168  

Riferimenti

  1. Barlow, R. B. Circadian rhythms in the Limulus visual system. J. Neurosci. 3, 856-870 (1983).
  2. Passaglia, C. L., Dodge, F. A., Barlow, R. B. Cell based model of the Limulus lateral eye. J. Neurophysiol. 80, 1800-1815 (1998).
  3. Snodderly, D. M. Processing of visual inputs by the brain of Limulus. J. Neurophysiol. 34, 588-611 (1971).
  4. Passaglia, C., Dodge, F., Herzog, E., Jackson, S., Barlow, R. Deciphering a neural code for vision. Proc. Natl. Acad. Sci. 94, 12649-12654 (1997).
  5. Barlow, R. B., Kaplan, E. Limulus lateral eye: properties of receptor units in the unexcised eye. Science. 174, 1027-1029 (1971).
  6. Bolbecker, A. R., Lewis, A. R., Swan, A. A., Carlson, K., Fleet, J. R., Beck, K. E., Wasserman, G. S. Stable Bellows Cup Electrode Demonstrates Low-frequency Properties of Long-term Electroretinographic Recordings in the Limulus Lateral Eye. J. Neurosci. Meth. 159, 252-260 (2007).
check_url/it/1384?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Liu, J. S., Passaglia, C. L. Using the Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus, in Vision Research. J. Vis. Exp. (29), e1384, doi:10.3791/1384 (2009).

View Video