Биолюминесценция Визуализация гемоксигеназы-1 регуляция в порядке Гуа Ша
Summary
Гуа Ша, традиционной китайской терапевтической очищая кожу, вызывает подкожные микрососудистых крови экстравазации. Мы сообщаем протокол биолюминесценции изображений HO-1-<em> Люциферазы</em> Трансгенных мышей, чтобы продемонстрировать, что Гуа Ша upregulates гемоксигеназы-1 (HO-1) в различных органах.
Abstract
Гуа Ша является традиционной китайской народной терапии, которая использует кожу очищая вызвать подкожные микрососудистых экстравазации крови и синяках. Протокол для биолюминесцентного оптических изображений HO-1-<em> Люциферазы</em> Трансгенных мышей, сообщается в этой рукописи обеспечивает быстрое<em> В естественных условиях</em> Количественное определение регуляция гемоксигеназы-1 (HO-1) экспрессии генов в ответ на процедуру Гуа Ша. HO-1 уже давно известно, обеспечивают цитопротекции от окислительного стресса. Регуляция HO-1, оценивается биолюминесценции выход, как полагают, представляют антиоксидантной ответ на циркулирующие гемоглобина продуктов, выпущенных на Гуа Ша. Гуа Ша назначали повторными ударами гладкие края ложкой по смазывать кожу на спине или другие целевые часть тела трансгенных мышей до петехии (осколок кровоизлияния) или кровоподтеки (синяки) свидетельствует о экстравазации крови из подкожных капилляров не обнаружено. После Гуа Ша, сессии биолюминесценции изображения проводились ежедневно в течение нескольких дней, чтобы следить за динамикой HO-1 выражение в различных внутренних органов.
Protocol
Discussion
Транскрипция HO-1, индуцибельной формы гемоксигеназы, является upregulated от многих факторов, включая гема, перекись водорода, УФ-облучение, гипоксия и физические стрессы. Всего изображений тела, такие как сообщили HO-1 биолюминесценции протокол обеспечивает быстрый снимок системного HO-1 выра…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
К. Вонг, STC Вонг поддерживает финансирование из функциональной и молекулярной визуализации центр, Бригам и женской больницы
К. Вонг, STC Вонг поддерживает центр биотехнологии и информатики, методистской больницы научно-исследовательского института, Weill Cornell Medical College.
К. К. Квонг, И. Чен, JQ Рен поддерживает финансирование из Athinoula А. Martinos Центра биомедицинской визуализации, Massachusetts General Hospital.
Lenuta Клетцер, Брейден Куо поддерживает финансирование из Neuroenteric исследовательский центр, Massachusetts General Hospital
Авторы благодарят доктора. В. Цзэн и X. Сюй оптических изображений Lab, Бригам и женской больницы за техническую помощь.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Luciferin | Caliper | P/N 122796 | Previously Xenogen | |
| IVIS 100 | Caliper | Previously Xenogen |
Riferimenti
- Zhang, W. Selection of potential therapeutics based on in vivo spatiotemporal transcription patterns of heme oxygenase-1. J Mol Med. 80, 655-6564 (2002).
- Zhang, W. Rapid in vivo functional analysis of transgenes in mice using whole body imaging of luciferase expression. Transgenic Res. 10, 423-434 (2001).
- Contag, C. H., Stevenson, D. K. In vivo patterns of heme oxygenase-1 transcription. J Perinatol. 21, 119-1124 (2001).
- Nielsen, A., Knoblauch, N. T., Dobos, G. J., Michalsen, A., Kaptchuk, T. J. The effect of Gua Sha treatment on the microcirculation of surface tissue: a pilot study in healthy subjects. Explore (NY). 3, 456-466 (2007).
- Schwickert, M. E., Saha, F. J., Braun, M., Dobos, G. J. Gua Sha for migraine in inpatient withdrawal therapy of headache due to medication overuse. Forsch Komplementmed. 14, 297-300 (2007).
- Tsai, P. S., Lee, P. H., Wang, M. Y. Demographics, training, and practice patterns of practitioners of folk medicine in Taiwan: a survey of the Taipei metropolitan area. J Altern Complement Med. 14, 1243-1248 (2008).
- Nielsen, A. Gua sha research and the language of integrative medicine. J Bodyw Mov Ther. 13, 63-72 (2009).
- Contag, C. H. Visualizing gene expression in living mammals using a bioluminescent reporter. Photochem Photobiol. 66, 523-531 (1997).
- Cui, K., Xu, X., Zhao, H., Wong, S. T. A quantitative study of factors affecting in vivo bioluminescence imaging. Luminescence. 23, 292-295 (2008).
- Shibahara, S., Yoshida, T., Kikuchi, G. Mechanism of increase of heme oxygenase activity induced by hemin in cultured pig alveolar macrophages. Arch Biochem Biophys. 197, 607-617 (1979).
- Lee, P. J. Hypoxia-inducible factor-1 mediates transcriptional activation of the heme oxygenase-1 gene in response to hypoxia. J Biol Chem. 272, 5375-5381 (1997).
- Maines, M. D. The heme oxygenase system: a regulator of second messenger gases. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 37, 517-554 (1997).
- Wunder, C., Potter, R. F. The heme oxygenase system: its role in liver inflammation. Curr Drug Targets Cardiovasc Haematol Disord. 3, 199-208 (2003).
- Hoekstra, K. A., Godin, D. V., Cheng, K. M. Protective role of heme oxygenase in the blood vessel wall during atherogenesis. Biochem Cell Biol. 82, 351-359 (2004).
- Yang, N. C., Lu, L. H., Kao, Y. H., Chau, L. Y. Heme oxygenase-1 attenuates interleukin-1beta-induced nitric oxide synthase expression in vascular smooth muscle cells. J Biomed Sci. 11, 799-809 (2004).
- Morse, D., Choi, A. M. Heme oxygenase-1: from bench to bedside. Am J Respir Crit Care Med. 172, 660-670 (2005).
- Ryter, S. W. Protective functions of heme oxygenase-1 and carbon monoxide in the respiratory system. Antioxid Redox Signal. 9, 2157-2173 (2007).
- Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
- Calabrese, V. Vitagenes, dietary antioxidants and neuroprotection in neurodegenerative diseases. Front Biosci. 14, 376-397 (2009).
- Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nat Med. 4, 245-247 (1998).
