Summary

전체 심장 이미징에 대한 형광 광 프로젝션 Tomography에 대한 출생 정규화

Published: June 02, 2009
doi:

Summary

우리는 정확하고 양적 형광 단층 reconstructions를 얻기 위해 몇 군데 샘플의 흡수 특성에 대한 계정 광학 프로젝션 Tomography 위해 태어난 표준 접근 (BnOPT)를하는 것이 좋습니다. 우리는 작은 동물의 기관 내에있는 형광 분자 프로브 분포를 재구성하기 위해 제안된 알고리즘을 사용합니다.

Abstract

광학 프로젝션 tomography는 최근 주로 발달 생물학 및 유전자 발현 연구에 이미징 도구로 소개되어 3 차원 영상 기술입니다. 기술이 먼저 그들을 dehydrating 후 벤질 알코올 및 2시 1분 비율 (밥 또는 머리의 클리어 솔루션)의 벤질 벤조 산의 혼합물에 배치하여 광학 투명 생물 학적 샘플을 렌더링. 기술 먼저 다음 벤질 알코올 및 취소 2시 1분 비율 (밥 또는 머리의 클리어 솔루션)의 벤질 벤조 산의 혼합물에서 그들을 배치 등급 에탄올 솔루션에서 그들을 dehydrating하여 광학 투명 생물 학적 샘플을 렌더링. 흡수 기여 완전히 제거될 수 없다면서 삭제 처리 후 시료의 산란 공헌을 획기적으로 줄일 수와 거의 무시할 만들 수 있습니다. 조사 샘플 내에 형광 분포를 재구성하려고하면,이 기여 이미지 유물 및 부량 오류로 불가피하게, reconstructions 및 리드에 영향을 .. 흡수가 주 또는 지운 미디어 개월 영속성과 함께 추가로 줄일 수 있지만, 이것은 형광의 진보적인 손실과 unrealistically 긴 샘플 처리 시간으로 이어질 것입니다. 두 외인성 대비 요원 (분자 대비 대리인)뿐만 아니라 내생 대비 (유전자 표현 형광 단백질의 예 reconstructions)을 재구성하면 마찬가지입니다.

Protocol

이미징 절차 실험 설정은 그림 1에 자세히 표시됩니다. 광원 LS는 흡수 측정을위한 조명으로, 형광 측정 여기 소스로 모두 제공되며, 그것은 좁은 밴드 통과 필터 BPF와 간섭 필터입니다. S는 샘플에 빛의 양을 제어하고 photobleaching을 방지하기 위해 충분히 낮은 유지하도록 자동으로 셔터의 존재와 함께 고정 및 가변 중립 밀도 필터 ND의 설정하십시오. 통일 샘플 조명은 빔 확장?…

Acknowledgements

C. Vinegoni 건강 (NIH) 부여 1 RO1 – EB006432 국립 연구소의 지원을 인정한다.

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Vinegoni, C., Razansky, D., Figueiredo, J., Fexon, L., Pivovarov, M., Nahrendorf, M., Ntziachristos, V., Weissleder, R. Born Normalization for Fluorescence Optical Projection Tomography for Whole Heart Imaging. J. Vis. Exp. (28), e1389, doi:10.3791/1389 (2009).

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