De Microfluïdische Probe: Werking en gebruik voor plaatselijke Surface Processing
Summary
In deze video presenteren we de microfluïdische probe<sup> 1</sup> (MFP). We leggen in detail hoe u de MFP assembleren, monteren bovenop een omgekeerde microscoop, en lijn deze ten opzichte van het substraat oppervlak, en tenslotte laten zien hoe het te gebruiken om een substraatoppervlak ondergedompeld in een bufferoplossing proces.
Abstract
Microfluïdische apparaten kunnen testen worden uitgevoerd met behulp van kleine hoeveelheden van het monster en zijn onlangs gebruikt om de micro-omgeving van de cellen te controleren. Microfluidics is vaak geassocieerd met gesloten microkanalen die hun gebruik te beperken tot monsters die kunnen worden ingevoerd, en gekweekt in het geval van cellen, in een beperkte volume. Aan de andere kant zijn micropipetting systeem gebruikt om lokaal perfuseren cellen en oppervlakken, met name met behulp van push-pull situaties waar een pipet fungeert als bron en het andere als zinken, maar de opsluiting van de stroming is moeilijk in drie dimensies. Bovendien, pipetten zijn kwetsbaar en moeilijk te positioneren en dus worden gebruikt in statische configuratie alleen.
De microfluïdische sonde (MFP) omzeilt de beperkingen opgelegd door de constructie van gesloten microfluïdische kanalen en in plaats van omsluiten het monster in de microfluïdische systeem, de microfluïdische stroom kan direct geleverd worden op het monster, en gescand over het monster, met behulp van de MFP. . De injectie en aspiratie openingen zijn gelegen binnen een enkele tientallen micrometers van elkaar, zodat een MicroJet geïnjecteerd in het gat wordt beperkt door de hydrodynamische krachten van de omringende vloeistof en volledig opgezogen terug in de andere opening. De MicroJet kan worden gespoeld over het substraatoppervlak en zorgt voor een nauwkeurige tool voor gelokaliseerde afzetting / levering van de reagentia die kan over grote gebieden worden gebruikt door het scannen van de sonde op het oppervlak. In deze video presenteren we de microfluïdische sonde 1 (MFP). We leggen in detail hoe u de MFP assembleren, monteren bovenop een omgekeerde microscoop, en lijn deze ten opzichte van het substraat oppervlak, en tenslotte laten zien hoe het te gebruiken om een substraatoppervlak ondergedompeld in een buffer proces.
Protocol
Discussion
De microfluïdische sonde (MFP) is veelzijdig, omdat het (i) mobiel, (ii) aanpasbaar voor gebruik met verschillende types van reagentia en substraat en het kan (iii) worden bediend over grote gebieden.
Ongewenste bellen kan leiden tot verstoring van de stroming om luchtbellen te vermijden, alle componenten moeten worden gevuld met vloeistof voorafgaand aan de montage. De kloof tussen de sonde en het oppervlak is slechts enkele micrometers, maar de mesa is enkele honderden micrometers breed, …
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door het Fonds de Recherche sur la Nature et les Technologies de Quebec, de Canada Fundation voor Innovatie en de Canadese Institutes of Health Research (CIHR).
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| microfluidic connectors | Upchurch Scientific | Micro- and Nano-tight fittings and sleeves | ||
| 2-component manual dispenser | Conprotec Inc. | DM400 | To dispense and mix PDMS mixture | |
| LabVIEW | National Instruments | Version 8.0 | ||
| Mechanical Convection Oven | VWR | 1330FM | ||
| Glass syringes | Hamilton | |||
| Capillary tubing | Polymicro Technologies | |||
| Plasma Chamber | Tegal Corporation | Plasmaline 415 | ||
| Inverted Microscope | Nikon | TE2000-E | ||
| Syringe pumps | Cetoni | neMESYS | ||
| Sylgard 184 | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | ||
| Camera | Photometrics | QuantEM 512SC | ||
| Microscope stage | ||||
| Microfluidic probe holder goniometers | Melles-Griot | 07GON504 | ||
| Linear stage | Applied Scientific Instrumentation | LS-50 | For z-control of the MFP | |
| Manual linear stage | Newport | 443-4 Series | For x- and y- axis control of the MFP | |
| Microscope stage | Applied Scientific Instrumentation | PZ-2000 | With x-, y- and z- control |
