Summary

Dayak Kalp görselleştirme Drosophila</em

Published: September 28, 2009
doi:

Summary

Larva ve yetişkin kalpte görüntülenmesi için gerekli Tekniği<em> Drosophila</em> Sundu. Her yaşam evresi, farklı bir metodoloji gerektirir.

Abstract

<em> Drosophila</em> Kalp son zamanlarda miyojenik kalpleri fonksiyonu altında yatan, genetik, hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için iyi bir model sistem olarak ortaya çıkmıştır. Sinek kalp fonksiyonu inceleyerek kilit bir adım hala dayak kalp organı gözlenmeli ve kaydedilmelidir için izin verirken miyojenik fonksiyonu korur kalbinde bir şekilde erişmek için bir yol bulmaktır. Larva ve yetişkin hem de kalpte gözleme ve kaydetme için iki farklı yöntem<em> Drosophila</em> Burada açıklanmıştır. Yetişkin sinekler kullanarak yarı sağlam bir hazırlık pigmente manikür girişim ve yağ organları örten karın kalp açıkça görüntülenmesini sağlar. Larva kalp kaydetmek için böylece miyokard kasılmaları ile ilişkili değildir kalp hareketleri azaltarak vücut duvarı hareketleri en aza indirir larva, hareketsiz için gerekli olan yener. Metodolojileri istikrarlı bir yetişkin ve saat için 1-3 Hz oranları yenebilir larva kalp hazırlıkları üretir.

Protocol

Başlamadan önce Yetişkin kalpleri Taze yapay hemolimf (AH) 108mm Na içeren çözüm + 5mM K +, 2mm Ca 2 +, 8mm MgCl 2, 1mm NaH 2 PO 4, 4mm NaHCO 3, 10mM sakaroz, 5mM trehaloz, 5mM Hepes (pH 7.1, tüm reaktiflerin gelen hazırlamak Sigma Kimyasallar). Sakaroz ve trehaloz kullanımı, bakteri bulaşmasını önlemek için amacıyla hemen önce buzdolabında stok çözümleri AH eklendi olmalıdır. Oda sı…

Discussion

Drosophila modeli embriyolojik gelişim öğrenme ve hafıza arasında değişen çeşitli bilimsel soruları gidermek için kullanılan güçlü bir genetik bir araç olduğu kanıtlanmıştır. Son zamanlarda bu çok yönlü bir model organizmanın genetik kalp fonksiyon sinek araştırmak için kullanılır olmuştur. Yetişkin Drosophila kalp fizyolojisi ölçmek için bir dizi girişimi sağlam sineklerin karın manikür yoluyla yapılan gözlemlere dayanıyordu. Bu yaklaşımların çoğu, tek bir parametre, kalp …

Acknowledgements

KO Amerikan Kalp Derneği bir hibe ile desteklenmektedir.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)   Roboz RS-5611 Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)   Roboz RS-5620  
Dumont #55 forceps   Fine Science Tools 11295-51  
Dumont #5 forceps   Fine Science Tools 11295-10  
Glass Capillaries, 100ul   VWR 53432-921  
Glass Capillaries, fine   Science Products GB100T8P  
Pipette Puller   Sutter Equipment P-97 Both horizontal and vertical pipette pullers will work
Plastic tubing   Tygon R-3603 1/16” inner diameter for 100μl capillaries
Plastic tubing   Tygon R-3603 1/32” inner diameter for small capillaries
Histoacryl® tissue adhesive   B.Braun, Melsungen    

References

  1. Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
  2. Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
check_url/1425?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Vogler, G., Ocorr, K. Visualizing the Beating Heart in Drosophila. J. Vis. Exp. (31), e1425, doi:10.3791/1425 (2009).

View Video