Larva ve yetişkin kalpte görüntülenmesi için gerekli Tekniği<em> Drosophila</em> Sundu. Her yaşam evresi, farklı bir metodoloji gerektirir.
Abstract
<em> Drosophila</em> Kalp son zamanlarda miyojenik kalpleri fonksiyonu altında yatan, genetik, hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için iyi bir model sistem olarak ortaya çıkmıştır. Sinek kalp fonksiyonu inceleyerek kilit bir adım hala dayak kalp organı gözlenmeli ve kaydedilmelidir için izin verirken miyojenik fonksiyonu korur kalbinde bir şekilde erişmek için bir yol bulmaktır. Larva ve yetişkin hem de kalpte gözleme ve kaydetme için iki farklı yöntem<em> Drosophila</em> Burada açıklanmıştır. Yetişkin sinekler kullanarak yarı sağlam bir hazırlık pigmente manikür girişim ve yağ organları örten karın kalp açıkça görüntülenmesini sağlar. Larva kalp kaydetmek için böylece miyokard kasılmaları ile ilişkili değildir kalp hareketleri azaltarak vücut duvarı hareketleri en aza indirir larva, hareketsiz için gerekli olan yener. Metodolojileri istikrarlı bir yetişkin ve saat için 1-3 Hz oranları yenebilir larva kalp hazırlıkları üretir.
Protocol
Başlamadan önce Yetişkin kalpleri Taze yapay hemolimf (AH) 108mm Na içeren çözüm + 5mM K +, 2mm Ca 2 +, 8mm MgCl 2, 1mm NaH 2 PO 4, 4mm NaHCO 3, 10mM sakaroz, 5mM trehaloz, 5mM Hepes (pH 7.1, tüm reaktiflerin gelen hazırlamak Sigma Kimyasallar). Sakaroz ve trehaloz kullanımı, bakteri bulaşmasını önlemek için amacıyla hemen önce buzdolabında stok çözümleri AH eklendi olmalıdır. Oda sı…
Discussion
Drosophila modeli embriyolojik gelişim öğrenme ve hafıza arasında değişen çeşitli bilimsel soruları gidermek için kullanılan güçlü bir genetik bir araç olduğu kanıtlanmıştır. Son zamanlarda bu çok yönlü bir model organizmanın genetik kalp fonksiyon sinek araştırmak için kullanılır olmuştur. Yetişkin Drosophila kalp fizyolojisi ölçmek için bir dizi girişimi sağlam sineklerin karın manikür yoluyla yapılan gözlemlere dayanıyordu. Bu yaklaşımların çoğu, tek bir parametre, kalp …
Acknowledgements
KO Amerikan Kalp Derneği bir hibe ile desteklenmektedir.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)
Roboz
RS-5611
Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)
Roboz
RS-5620
Dumont #55 forceps
Fine Science Tools
11295-51
Dumont #5 forceps
Fine Science Tools
11295-10
Glass Capillaries, 100ul
VWR
53432-921
Glass Capillaries, fine
Science Products
GB100T8P
Pipette Puller
Sutter Equipment
P-97
Both horizontal and vertical pipette pullers will work