Hemos desarrollado un método semi-automatizado de análisis óptico Heartbeat (SOHA) para el análisis de grabaciones de alta velocidad óptica de<em> Drosophila</em>, El pez cebra y en los corazones de embriones de ratón. Se demuestra la aplicación de nuestra metodología para el análisis de la función cardíaca en mosca de la fruta y los corazones de embriones de ratón.
Abstract
Hemos desarrollado un método para el análisis de grabaciones de alta velocidad óptica de<em> Drosophila</em>, El pez cebra y en los corazones de embriones de ratón (Fink, et. Al., 2009). Nuestros semi-automático de análisis latido óptico (SOHA) utiliza un algoritmo de detección de movimiento nuevo que es capaz de detectar los movimientos cardiacos asociados con cada contracción y relajación eventos. El programa ofrece una serie de lecturas fisiológicamente relevantes, incluyendo sistólica y diastólica, intervalos, ritmo cardíaco, así como las medidas cualitativas y cuantitativas de arrhythmicity latido del corazón. El programa también calcula las mediciones de diámetro de corazón durante tanto diástole y sístole de la cual se calcula la fracción de acortamiento fraccional y los cambios de zona. La salida se proporciona como un archivo digital compatible con la mayoría de los programas de hoja de cálculo. Las mediciones se realizan para cada latido del corazón en un registro de aumentar la potencia estadística de la salida. Se demuestra cada uno de los pasos que se requiere entrada del usuario y mostrar la aplicación de nuestra metodología para el análisis de la función cardíaca en los tres modelos del corazón genéticamente tratable.
Protocol
Haga clic aquí para ver un resumen de los semi automatizado de análisis latido del corazón (SOHA) procedimiento. Semi-automatizado de análisis óptico de latidos del corazón 1. Preprocesar – Este paso ofrece información sobre los diámetros cardíaca diastólica y sistólica. Los bordes del corazón son identificados y marcados …
Discussion
El modelo de Drosophila ha demostrado ser una potente herramienta genética que se ha utilizado para tratar una variedad de problemas científicos que van desde el desarrollo embrionario para el aprendizaje y la memoria. Recientemente, este organismo modelo versátil se ha utilizado para investigar la genética de la función cardíaca. Un número de intentos de cuantificar la fisiología del corazón en adultos de Drosophila se han basado en observaciones realizadas en las moscas intacta a través de la cutícula abdom…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
KO y AC son apoyados por una beca y beca a de la Asociación Americana del Corazón. SIB y RB son apoyados por las subvenciones del NIH.
Materials
Material Name
Tipo
Company
Catalogue Number
Comment
MatLab software
Math Works, Inc
Required environment for the analysis software.
EM-CCD digital camera
Hamamatsu Corp.
9100 or 9300
Other high speed digital cameras will also work.
HC image data capture software
Hamamatsu Corp.
Other image capture software that produces movies in avi format will also work.
Light Microscope with 10x objective
Leica
A dipping lens that eliminates the air water interface greatly improves resolution
Ocorr, K., Fink, M., Cammarato, A., Bernstein, S. I., Bodmer, R. Semi-automated Optical Heartbeat Analysis of Small Hearts. J. Vis. Exp. (31), e1435, doi:10.3791/1435 (2009).