التصاق الصفائح الدموية في تتالي يحدث في وجود تدفق القص ، وهو عامل لا تحتسب في المقايسات التقليدية جيدا لوحة (ثابتة). هذه المقالة على تقارير الفحص الصفيحات التجميع ، وذلك باستخدام لوحة ميكروفلويديك جيدا تنسيق لمحاكاة الظروف الفسيولوجية تدفق القص.
يحدث تراكم الصفائح الدموية في استجابة لإصابة الأوعية الدموية حيث تعرضت المصفوفة خارج الخلية تحت البطانة. التصاق الصفائح الدموية في تتالي يحدث في وجود تدفق القص ، وهو عامل لا تحتسب في المقايسات التقليدية جيدا لوحة (ثابتة). هذه المقالة على تقارير الفحص الصفيحات التجميع ، وذلك باستخدام لوحة ميكروفلويديك جيدا تنسيق لمحاكاة الظروف الفسيولوجية تدفق القص. تترسب البروتينات خارج الخلية ، والكولاجين الأول أو عامل فون ويلبراند داخل القناة ميكروفلويديك به نضح نشطة مع مضخة هوائية. ثم تغسل مع البروتينات المصفوفة العازلة وسدت لإعداد قناة ميكروفلويديك للتفاعل الصفيحات. هو الدم الكامل perfused المسمى مع صبغة الفلورسنت من خلال القناة في معدلات تدفق مختلفة من أجل تحقيق تنشيط الصفائح الدموية وتجميعها. يمكن إضافة مثبطات تكدس الصفيحات قبل تدفق التجربة الخلية لتوليد البيانات IC50 الاستجابة للجرعة.
في حين عرضت هنا باستخدام أساليب محددة بروتين المصفوفة خارج الخلية ومثبط محددة من تراكم الصفائح الدموية ، والبروتوكول هو توسعة لطبقات الطلاء الأخرى ، وأنواع الخلايا الأخرى ، ومثبطات أخرى للفحوصات التصاق الخلية. المكونات الأساسية لنجاح مثل هذه التجارب هي تجنب فقاعات في القنوات ميكروفلويديك ، التخفيف الصحيح لجميع الكواشف منظفة في الصحيح ، والظروف الملائمة لاحتضان جميع الكواشف.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
collagen I, Bovine | Reagent | Invitrogen | A1064401 | other sources of collagen I can be used |
PBS plus Ca/Mg | Reagent | Invitrogen | 14040-117 | |
Bovine serum albumin (BSA) | Reagent | EMD | EM-2930 Bottom of Form | From VWR |
calcein AM | Reagent | Invitrogen | C1430 | Calcein AM from BD can also be used |
BioFlux 1000 System | Reagent | Fluxion Biosciences | Contact Company | |
BioFlux Plate | Reagent | Fluxion Biosciences | 900013 | |
antiGPIIb/IIIa | Reagent | Abcam | ab33407 | an alternative # is ab15021 |
ReoPro | Reagent | Eli Lilly | by Rx only |