Murine Colitis Modeling mit Dextransulfat Sodium (DSS)
Summary
Dextransulfat-Natrium (DSS) im Trinkwasser verabreicht wird eine etablierte murine entzündlichen Verletzungen Modell der akuten Colitis. Dieses Protokoll beschreibt die Methode für die DSS-Behandlung und der Aufbereitung der Gewebe.
Abstract
– Morbus Crohn Colitis vor allem Colitis ulcerosa und die Kolon-Variante des Morbus Crohn, Colitis können von viralen oder bakteriellen Infektionen, ischämischen Insult oder Autoimmunerkrankungen auftreten. Akute Kolitis kann mit Bauchschmerzen und Blähungen, Malabsorption, Durchfall, Hämatochezie und Schleim im Stuhl zu präsentieren. Wir sind dabei, die komplexen Wechselwirkungen zwischen Umwelt, Genetik und epithelialen Barriere Dysfunktion bei chronisch entzündlichen Darmerkrankungen und Tiermodellen der Colitis wurden wesentliche Fortschritte in unserem Verständnis dieser Krankheit zu verstehen. Ein beliebtes Modell beinhaltet Ergänzung des Trinkwassers von Mäusen mit niedermolekularen Dextran Natriumsulfat (DSS), die sich in epithelialen Schäden und eine robuste entzündliche Reaktion in den Dickdarm mehrtägigen<sup> 1</sup>. Variationen dieser Ansatz kann verwendet werden, um akute Verletzungen, akuten Verletzungen, die durch Reparatur folgte, und wiederholten Zyklen von DSS mit Recovery-Modellierung chronisch-entzündlichen Erkrankungen durchsetzt Modell<sup> 2</sup>. Nach einem viertägigen Behandlung von 3% DSS im Trinkwasser, zeigen Mäuse Anzeichen einer akuten Colitis, einschließlich Gewichtsverlust, Blut im Stuhl und Durchfall. Mäuse sind am Ende der Behandlung natürlich eingeschläfert und bei der Autopsie seziert Doppelpunkte verarbeitet und kann 'Swiss gerollt "<sup> 3</sup> Zu erlauben mikroskopische Analyse des gesamten Dickdarms oder infundiert mit Formalin als "Würstchen" zu makroskopischen Analyse zu ermöglichen. Das Gewebe wird dann in Paraffin eingebettet geschnitten und gefärbt zur histologischen überprüfen.
Protocol
Discussion
Dieses Protokoll kann geändert werden, um akute Verletzungen, Verletzungen zu reparieren, oder chronische Dickdarm-Verletzung Prozesse zu modellieren.
Akute Verletzungen Änderung:
DSS-Behandlung ad lib für 4-6 Tage durch sofortige Opfer gefolgt
Injury-Repair Änderung:
Injury mit 4-6 Tagen DSS Behandlung durch Erholungsphase von 3-4 Tagen und Opfer (wie in oben beschriebenen Protokoll) gefolgt.
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The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Eine Förderung von NIH (1 K08 DK080221-01) und Vanderbilt institutionellen Fonds für die Entwicklung.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Dextran Sulfate Sodium Salt | USB Corp | 9011-18-1 | mol wt 40,000-50,000 | |
| 10% Buffered Formalin Phosphate | Fisher Scientific | SF100-4 | ||
| Isoflurane, USP | Phoenix Pharmaceuticals | NDC 57319-474-06 | ||
| TISSUE PATH Macrosette Cassettes | Fisher Healthcare | 15182706 | ||
| BD 10 ml Syringe | B-D | 309604 | ||
| Ethyl Alcohol | Pharmco-Aaper | E190 | Dilute to 70% with distilled water | |
| 20G Straight Feeding Needle | VWR | 20068-612 | ||
| 27G1/2 PrecisionGlide Needle | B-D | 305109 | ||
| Dissecting Scissors Sharp/Blunt Tip | VWR | 82027-588 | ||
| Waugh Forceps | VWR | 82027-428 | ||
| Non-absorbable Suture | LOOK Surgical Specialties | SP116 | ||
| Whatman Blotting Paper | VWR | 28298-020 | Cut as needed | |
| Nalgene Surfactant-Free Cellulose Acetate (SFCA) Filter | Cole-Parmer | EW-06731-2 | ||
| Carbon fiber composites digital caliper | Fisher Scientific | 15-007-958 |
Riferimenti
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