תמוגה אוטומטי Microfluidic דם פרוטוקול העשרה של מחזורי תאים גרעיני
Summary
מכשיר אוטומטי microfluidic פותחה עבור במחזור העשרה תא גרעיני מן הדם ההיקפיים באמצעות תמוגה כדורית אדומה המבטיח בידוד המדגם באיכות גבוהה ללא אובדן התא.
Abstract
בדו"ח זה פרוטוקול עבור מכשיר אוטומטי תמוגה microfluidic דם מפורט. במחזור התאים בעלי הגרעין (CNCs), כולל לויקוציטים ותאי האנדותל, לספק פלטפורמה אידיאלית עבור מצב עדכנית על מצב המערכת החיסונית של אדם. פרוטוקול microfluidic מאפשרת העשרה של CNCs ללא הפסד תא סלקטיבית הכנת המדגם השתנות עקב המשתמש בתיווך צעדים. בקצרה, הפרוטוקול כולל ייצור המכשיר, אוסף מדגם, הגדרת המכשיר, והפעלה הדם דרך תא microfluidic. בתוך המכשיר הדם כולו מעורבב במהירות של כ 10 שניות בתוך 50 מיקרון ערוץ x 150 microfluidic מיקרון עם מים deionized. בזמן הזה הם אריתרוציטים תוחלת lysed בשל תנאי hypotonic. מבנים אדרה בתחתית הערוץ להבטיח ערבוב יסודי חשיפה של תאים לסביבה קבוע. התאים הנותרים הם חזרו לתנאים איזוטוני ביציאה של המכשיר, שימוש קבוע paraformaldehyde 2%, centrifuged להפריד פסולת כדורית אדומה מן CNCs, ותלויה חיץ זרימה עבור מכתים וניתוח על ידי cytometry הזרימה. תוצאות להראות נקי cytometry זרימה פיזור חלקות עם אוכלוסיות CNC נשמר. המשמעות של המכשיר הזה מגיע פרוטוקול במחקר והבנה של בהיווצרות המחלה על ידי ניתוח של אוכלוסיות CNC. לפיכך, אוטומציה, יעילות, ופשטות של פרוטוקול microfluidic הם הפגינו.
Protocol
Discussion
תמוגה אוטומטיות microfluidic פרוטוקול בדם דווחה. בתוך הפרוטוקול הם צעדים קריטיים ראוי לציין. בסעיף P.2.1, חשוב להשליך את הבקבוקון הדם הראשונה שנאספו במדגם מכיל וחילצה לתאי אנדותל בוגרים מתנהג כמו חיוביות שגויות. ודאו גם להפעיל את דגימת דם בתוך שעה של אוסף. תחול המכשיר microfluidic …
Acknowledgements
המחקר נתמך על ידי קרן פרס ח 'וולאס קולטר קריירה בתחילת Translational מחקר. הודות טים אנדרוז, להמטולוגיה / Oncology, לעזרה עם אוסף דגימת דם. כמו כן, הודות ד"ר סם ולהאוזן, cytometry Core זרימה, ג'יימס גרהאם בראון Cancer Center, עזרה בניהול תזרים cytometry דגימות.
Riferimenti
- White, W. Clinical application of microfluidic leukocyte enrichment protocol in mild phenotype sickle cell disease (SCD. Biomedical Microdevices. 11 (2), 477-483 (2009).
- Sethu, P. Continuous Flow Microfluidic Device for Rapid Erythrocyte Lysis. Anal. Chem. 76 (21), 6247-6253 (2004).
