Primario cellule epiteliali bronchiali umane Grown da espianti

Sommario

Qui si descrive un metodo dettagliato per la coltivazione primaria cellule epiteliali bronchiali umane da espianti di tessuti umani delle vie aeree bronchiali tra cui la crescita differenziati su un aria-liquido. Questo metodo fornisce una fonte abbondante di cellule primarie per indagare il ruolo dell'epitelio delle vie aeree dei polmoni umani nella salute e nella malattia.

Abstract

Cellule epiteliali bronchiali umane sono necessarie per modelli cellulari della malattia e per indagare l'effetto di eccipienti e agenti farmacologici sulla funzione e la struttura delle cellule epiteliali umane. Qui si descrivono in dettaglio il metodo di coltivazione cellule epiteliali bronchiali dal tessuto delle vie aeree bronchiali che viene raccolto dal chirurgo al momento della chirurgia polmonare (ad esempio il cancro ai polmoni o di riduzione del volume polmonare). Con l'approvazione etica e il consenso informato, il chirurgo prende ciò che è necessario per patologia e ci fornisce una porzione bronchiale che è lontano dalle zone malate. Il tessuto viene quindi utilizzato come fonte di espianti che possono essere utilizzati per la coltivazione di cellule primarie epiteliali bronchiali in coltura. Segmenti bronchiali circa 0,5-1cm di lunghezza e ≤ 1 centimetro di diametro, sono sciacquati con EBSS freddi e eccesso di tessuto parenchimale è stato rimosso. I segmenti sono tagliati aperti e tritata in 2-3mm

Protocollo

Umano segmenti bronchiale fornire una fonte abbondante di cellule primarie epiteliali bronchiali. In questo articolo viene descritto un protocollo per la crescita e l'espansione di Human epiteliali bronchiali (HBE) cellule appena isolate segmenti bronchiali umane. Questo protocollo si compone di cinque sezioni:

1. Rivestimento e Scratching piastre di coltura 100 millimetri
2. Preparazione Espianti tessuto bronchiale
3. Trapianti di tessuto bronchiale
4. Passaggio di cellule HBE
5. Crescere Cellule HBE ciliato in Transwells

Prima di iniziare Si noti che tutti i passaggi sono fatt....

Discussione

In questo studio abbiamo presentato i metodi dettagliati per la cultura e l'espansione delle primarie cellule epiteliali bronchiali umane. Abbiamo dimostrato come espianti e trapianti di tessuto bronchiale, colta nei media che promuovono la crescita delle cellule epiteliali, in grado di fornire una fonte continua di cellule epiteliali delle vie respiratorie umane per gli studi di non-differenziati modelli cellulari (in immersione) e differenziata (cresciuta in aria-liquido) . Queste cellule possono essere utilizzate.......

Materiali

Altri requisiti: incubatore, biologici di sicurezza cabinet (BSC), centrifughe, piastre di coltura da 100 mm, provette sterili (15 ml, 50 ml, e 2 ml), puntali sterili, manico bisturi e lame, di piccole forbici affilate, camici e guanti. Questi possono essere ottenuti dai vostri fornitori preferiti.