Enregistrements tableau multiélectrodes de l'épithélium Vomeronasal
Summary
Multiélectrodes array (MEA) enregistrements fournissent une méthode pour étudier l'activité électrique des grandes populations de neurones. Ici, nous présentons les détails d'une préparation de la MEA pour enregistrer à partir de l'épithélium de souris voméronasal tout en stimulant le tissu.
Abstract
Comprendre les circuits neuronaux nécessite des méthodes pour enregistrer à partir de nombreux neurones simultanément. Pour<em> In vitro</em> Les études, une seule technologie actuellement disponible est planaire array multiélectrodes (MEA) d'enregistrement. Ici, nous documenter l'utilisation des AME pour étudier la souris voméronasal organe (VNO), qui joue un rôle essentiel dans la détection des phéromones et des indices sociaux via une population diversifiée de neurones sensoriels exprimant des centaines de types de récepteurs. Combinant l'enregistrement MEA avec un gestionnaire robotique de liquide pour administrer des stimuli chimiques, les réponses sensorielles d'une population importante et diversifiée de neurones peuvent être enregistrées. La préparation nous permet d'enlever le neuroépithélium intacte du VNO de la souris et stimuler avec une batterie de produits chimiques ou des ligands potentiels tout en surveillant l'activité électrique des neurones pendant plusieurs heures. Par conséquent, cette technique sert comme une méthode utile pour évaluer l'activité du ligand ainsi que d'explorer les propriétés des neurones récepteurs. Nous présentons les techniques nécessaires pour préparer l'épithélium voméronasal, l'enregistrement des AEM, et une stimulation chimique.
Protocol
Discussion
Enregistrements array multiélectrodes nous permettent la possibilité de surveiller l'activité simultanée d'une population importante de neurones. C'est un outil utile pour sonder les propriétés d'un système sensoriel, en particulier le VNO. Contrairement au système olfactif principal, le VNO détecte les stimuli en phase liquide. En outre, le VNO est un tissu hétérogène. Il ya environ 300 types différents de récepteurs chez la souris une, sans doute avec des profils de réponse di…
Acknowledgements
Nous tenons à remercier les membres du Laboratoire Saint. Ce travail a été soutenu par l'Institut national des troubles Surdité et Communication (R01 DC005964 à LA) et NSF IGERT 0548890 (AHA).
Expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec les lois des États-Unis la protection des animaux et des National Institutes of Health et de directives ont été approuvées par les soins des animaux de Washington University et le Comité d'utilisation.
Riferimenti
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
