Multielektroden Array Recordings der Vomeronasal Epithel
Summary
Multielektroden Array (MEA)-Aufnahmen stellen eine Methode zur Untersuchung der elektrischen Aktivität des großen Populationen von Neuronen. Hier präsentieren wir die Details eines MEA Vorbereitung auf die von der Maus vomeronasalen Epithel aufzeichnen, während gleichzeitig die Förderung der Gewebe.
Abstract
Understanding neuronalen Schaltkreisen erfordert Methoden, um aus vielen Neuronen gleichzeitig aufzunehmen. Für<em> In-vitro-</em> Studien, eine derzeit verfügbaren Technologie ist planar Multielektroden Array (MEA) Aufnahme. Hier dokumentieren wir die Verwendung von MEAs zur Maus Vomeronasalorgan (VNO), die eine wesentliche Rolle bei der Erkennung von Pheromonen und soziale Signale über eine vielfältige Bevölkerung von sensorischen Neuronen exprimiert Hunderte von Arten von Rezeptoren zu untersuchen. Die Kombination MEA-Aufnahme mit einem Roboter-Liquid Handler auf chemische Reize liefern, kann die sensorische Reaktionen einer großen und vielfältigen Bevölkerung von Neuronen aufgenommen werden. Die Vorbereitung ermöglicht es uns, die intakte Neuroepithel des VNO von der Maus zu entfernen und zu stimulieren mit einer Batterie von Chemikalien oder potentiellen Liganden bei der Überwachung der elektrischen Aktivität der Neuronen für mehrere Stunden. Daher dient diese Technik als eine nützliche Methode zur Beurteilung der Liganden-Aktivität sowie die Erforschung der Eigenschaften von Rezeptorneuronen. Wir präsentieren Ihnen die Techniken erforderlich, um die vomeronasalen Epithel, MEA Aufnahme und chemische Stimulation vorzubereiten.
Protocol
Discussion
Multielektroden Array-Aufnahmen ermöglichen es uns die Möglichkeit, die gleichzeitige Tätigkeit von einer großen Population von Neuronen zu überwachen. Dies ist ein nützliches Werkzeug für die Erforschung der Eigenschaften eines sensorischen Systems, insbesondere des VNO. Im Gegensatz zu den wichtigsten olfaktorischen System, erkennt das VNO Reize in der flüssigen Phase. Darüber hinaus ist das VNO ein heterogenes Gewebe. Es gibt ungefähr 300 verschiedene Arten von Rezeptoren in der Maus 1, vermutlic…
Acknowledgements
Wir möchten die Mitglieder des Heiligen Lab danken. Diese Arbeit wurde durch das Nationale Institut für Taubheit und Communication Disorders (R01 DC005964 zu THE) und NSF IGERT 0548890 (HAA) unterstützt.
Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den Vereinigten Staaten Animal Welfare Acts und National Institutes of Health Richtlinien durchgeführt und waren von der Washington University Animal Care und Verwenden Committee genehmigt.
Riferimenti
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
