Summary

Vomeronasal 상피의 Multielectrode 배열 레코딩

Published: March 01, 2010
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Summary

Multielectrode 어레이 (MEA) 녹음 뉴런의 대규모 인구의 전기적 활동을 연구하는 방법을 제공합니다. 여기, 우리는 동시에 조직을 자극하는 동안 마우스 vomeronasal 상피에서 기록 MEA 준비의 세부 사항을 제시한다.

Abstract

신경 회로를 이해하는 것은 방법이 동시에 여러 뉴런에서 기록해야합니다. 에<em> 체외에서</em> 연구 하나의 현재 사용 가능한 기술은 평면 multielectrode 배열 (MEA) 기록입니다. 여기 수용체의 유형의 수백을 표현하는 감각 뉴런의 다양한 인구를 통해 페로몬과 사회적 단서의 검색에 필수적인 역할을 마우스 vomeronasal 기관 (VNO)을 공부하기 MEAs의 사용을 문서. 화학 자극을 제공하는 로봇 액체 처리기와 MEA의 녹음을 결합, 뉴런의 크고 다양한 인구의 감각 반응이 기록하실 수 있습니다. 준비는 우리가 마우스에서 VNO의 손상 neuroepithelium를 제거하고 몇 시간 동안 뉴런의 전기 활동을 모니터링하면서 화학 물질이나 잠재적인 리간드의 배터리와 자극 수 있습니다. 따라서이 기술은 리간드의 활동을 평가뿐만 아니라 수용체 뉴런의 속성을 탐험을위한 유용한 방법으로 제공하고 있습니다. 우리는 vomeronasal 상피, MEA 녹음, 화학 자극을 준비하는 데 필요한 기술을 제시한다.

Protocol

1 부. 전기 녹음 계측 우리는 실리콘 질화물과 절연 10 μm의 평면 티타늄 질화물 전극과 평면 multielectrode 배열을 (에이러 과학 악기)을 사용합니다. 60 전극 30 μm의 중심 – 투 – 중심 간격 5×6 격자로 이루어진 두 분야로 정렬됩니다. (다른 구성도 가능합니다, 직경 녹음 표면에 10 μm의와 전극은 단일 뉴런의 활동을 격리의 관점에서 큰 전극보다 수 있습니다.) 전기 신호는 MEA 1,060 앰프 (?…

Discussion

Multielectrode 배열 레코딩은 우리에게 뉴런의 큰 인구의 동시 활동을 모니터링하는 능력을 허용합니다. 이것은 특히, VNO를 감각 시스템의 속성을 탐색을위한 유용한 도구입니다. 메인 후각 시스템과는 달리, VNO는 액상의 자극을 감지합니다. 또한, VNO는 이질적인 조직이다. 아마도 다른 응답 프로필 마우스 1 수용체의 약 300 종류가 있습니다. 로봇 팔을와 결합된 MEA 레코딩은 우리가 안정적으…

Acknowledgements

우리는 성령 연구소의 회원을 감사드립니다. 이 작품은 청각 및 통신 장애에 대한 국립 연구소 (R01 DC005964로)와 NSF IGERT 0548890 (하)에 의해 지원되었다.

동물 실험은 미국 동물 복지 행위 및 건강 지침 국립 연구소에 따라 수행되었으며 워싱턴 대학 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.

Riferimenti

  1. Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
  2. Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
  3. Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
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Citazione di questo articolo
Arnson, H. A., Fu, X., Holy, T. E. Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium. J. Vis. Exp. (37), e1845, doi:10.3791/1845 (2010).

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