Schnelle Homogene Detektion von biologischen Assays mit magnetischen Modulation Biosensorik-System
Summary
Magnetic Modulation Biosensorik System wird genutzt, um schnell, feinfühlig und einfach erkennen biologischen Assays, wie DNA-Moleküle und Proteine.
Abstract
Eine magnetische Modulation Biosensorik System (MMB) [1,2] schnell und homogen erkannt biologischer Targets bei niedrigen Konzentrationen ohne Waschen oder Trennschritt. Wenn die IL-8 Target anwesend war, eine "sandwich'-basierter Assay magnetische Beads mit IL-8 Fänger-Antikörper an gekoppelten fluoreszierenden Proteins über die IL-8 Target und einem biotinylierten IL-8-Antikörper Streptavidin. Die magnetischen Beads werden in schwingende Bewegung durch Anlegen einer Wechselspannung Magnetfeldgradienten durch zwei elektromagnetische Pole manövriert. Die fluoreszierenden Proteine, die den magnetischen Kügelchen befestigt sind, sind in den Erfassungsbereich und ihre Bewegung in und aus einem orthogonalen Laserstrahl erzeugt eine periodische Fluoreszenzsignal, demoduliert mit synchronen Erfassung wird kondensiert. Die magnetische Modulation Biosensoren wurde bereits verwendet, um die kodierenden Sequenzen des nicht-strukturellen Ibaraki Virus-Protein 3 (NS3) komplementäre DNA (cDNA) [2] zu erkennen. Die Techniken, die in dieser Arbeit für externe Manipulation und Kondensation von Teilchen nachgewiesen werden können, für andere Anwendungen, zB Lieferung von magnetisch gekoppelt Drogen verwendet werden<em> In-vivo</em> Oder den Kontrast für<em> In-vivo</em> Imaging-Anwendungen.
Protocol
Discussion
Zusammenfassend haben wir gezeigt, dass die MMB-System verwendet werden, um die Anwesenheit von IL-8 Target bei niedrigen Konzentrationen (0,5 pico-Gramm liegt die Nachweisgrenze des Bio-Plex Precision Pro Zytokin-Assays [3,4]) zu erkennen. Die Fähigkeit des Systems ist nicht auf IL-8 begrenzt und kann verwendet werden, um andere Proteine zu erkennen. Die Vorteile des MMB-System sind die Fähigkeit, das Ziel schnell und ohne Trenn-oder Waschschritt zu erkennen. So erleichtert es die Erkennung und ermöglicht dem …
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde teilweise durch die Ishaya Horowitz Fund unterstützt.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set | Bio-Rad | 171-B5008M | ||
| Recombinant human IL-8 target | Thermo Scientific | R202625 | ||
| Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8 | BD Biosciences | 554718 | ||
| Streptavidin coupled fluorescent protein | Bio-Rad | Streptavidin PE |
Riferimenti
- Danielli, A., Arie, A., Porat, N., Ehrlich, M. Detection of fluorescent-labeled probes at sub-picomolar concentrations by magnetic modulation. Optics Express. 16, 19253-19259 (2008).
- Danielli, A., Porat, N., Arie, A., Ehrlich, M. Rapid homogenous detection of the Ibaraki virus NS3 cDNA at pico-molar concentrations by magnetic modulation. Biosensors and Bioelectronics. 25, 858-863 (2009).
- . . Bio-Rad “Human angiogenesis assay panel”. , .
- . Instruction Manual. Bio-Plex Precision Pro Cytokine Assay. , .
