عزل الشريان السري الإنسان خلايا العضلات الملساء (HUASMC)
Summary
يتم استخدام الحبل السري لعزل خلايا العضلات الملساء بطرق مختلفة. في هذا العمل استخدمنا العلاج الأنزيمية لعزل خلايا العضلات الملساء.
Abstract
الحبل السري البشري (جامعة كاليفورنيا) هو عينة البيولوجية التي يمكن الحصول عليها بسهولة بعد الولادة. هذه العينة البيولوجية ، معظم الوقت ، وتجاهل جمعها لا ينطوي على أي خطر إضافة إلى صحة الأطفال حديثي الولادة أو والدة. وعلاوة على ذلك لا تثار مخاوف أخلاقية. وتتألف لجامعة كاليفورنيا واحد واثنين من الشرايين الوريد من الخلايا البطانية التي على حد سواء (ECS)<sup> 1</supخلايا العضلات> وسلس (SMCs)<sup> 2</sup> ، يمكن عزل اثنين من المكونات الخلوية الرئيسي للأوعية الدموية. في هذا المشروع تم الحصول عليها بعد العلاج SMCs الأنزيمية الشرايين جامعة كاليفورنيا وفقا لذلك الإجراء التجريبية التي سبق وصفها جافي<em> وآخرون</em<sup> 3</sup>. بعد عزل الخلايا وضعوا في فلاش تي مع DMEM – F12 تستكمل مع 5 ٪ من مصل بقري جنيني وكانت العديد من المقاطع للمثقف. الحفاظ على خلايا خصائصها المظهرية الشكلية وغيرها في مختلف الأجيال. والهدف من هذه الدراسة هو عزل خلايا العضلات الملساء لاستخدامها كنماذج لفحوصات المخدرات في المستقبل مع المضيقة وعزل وتوصيف هيكليا قنوات الكالسيوم من نوع L ، لدراسة الجوانب الخلوية والجزيئية وظيفة الأوعية الدموية<sup> 4</sup> واستخدامها في هندسة الأنسجة.
Protocol
Discussion
يمكن استخدام SMC كنماذج لفحوصات المخدرات في المستقبل مع المضيقة ، لعزل وتوصيف هيكليا قنوات الكالسيوم من نوع L ، لدراسة الجوانب الخلوية والجزيئية وظيفة الأوعية الدموية واستخدامها في هندسة الأنسجة. ECS SMCs وأساسية لتطوير المواد الحيوية الجديدة التي يمكن استخدامها في إنت?…
Acknowledgements
مستشفى Lusitano أماتو ، كاستيلو برانكو البرتغال.
مستشفى سوزا مارتينز ، جواردا البرتغال.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM-F12 | Sigma-Aldrich | 095K8311 | ||
| Fetal bovine serum (FBS) | Biochrom-AG | 0117T | ||
| RPMI 1640 | Gibco | 3103806 | ||
| Collagen | Sigma-Aldrich | 067K2302 | ||
| Antibiotic | 10 μL/ 1 mL of medium | |||
| Scissors | Sterilized | |||
| Needle | Diameter of 0.6-1mm | |||
| Syringe | 10 – 20 mL | |||
| Physiological Saline Solution (PSS) | 20-40 mL per artery | |||
| Collagenase type I | Sigma-Aldrich | 047K1052 | 3 mL per artery | |
| Hank’s Buffered Salt Solution(HBSS) | Diluted collagenase | |||
| Phosphate buffered saline solution (PBS) | Warmed to 37°C |
Riferimenti
- Van Rijen, H. Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins. The American journal of physiology. 272 (1 PT 1), C117-C117 (1997).
- Martín de Llano, J. Procedure to consistently obtain endothelial and smooth muscle cell cultures from umbilical cord vessels. Translational Research. 149 (1), 1-9 (2007).
- Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria. J Clin Invest. 52 (11), 2745-2756 (1973).
- Cairrão, E., Santos-Silva, A., Alvarez, E., Correia, I., Verde, I. Isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells expressing functional calcium channels. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. 45 (3), 175-184 (2009).
