כרוני סלמונלה עכבר אינפקטד דגם
Summary
לבסס מודל כרוני חיידקי עכבר נגוע מתמיד<em> סלמונלה</em> Typhimurium קולוניזציה במעי במשך 27 שבועות.
Abstract
המודל חיידקי עכבר נגוע היא מערכת מודל רב עוצמה ללימוד בתחומים כגון דלקת זיהום, אימונולוגיה, התמרה האות, ו tumorigenesis. חוקרים רבים ניצלו קוליטיס המושרה על ידי<em> סלמונלה</em> Typhimurium עבור מחקרים בשלב מוקדם של דלקת וזיהום. עם זאת, רק דיווחים מעטים על זיהום כרוני<em> In vivo</em>. עכברים עם<em> סלמונלה</em> קיום מתמשך במערכת העיכול מאפשרים לנו לחקור את המארחת בקטריאלי לטווח ארוך אינטראקציה, התמרה האות, ו tumorigenesis. הקמנו מודל כרוני חיידקי עכבר נגוע<em> סלמונלה</em> Typhimurium קולוניזציה במעי העכבר מעל 6 חודשים. כדי להשתמש במערכת, זה הכרחי עבור החוקר ללמוד איך להכין את התרבות חיידקים gavage החיות. אנו פרט מתודולוגיה תרבית החיידקים להכין ועכברים gavage. כמו כן, אנו מראים כיצד לזהות את<em> סלמונלה</em> התמדה במערכת העיכול. בסך הכל, פרוטוקול זה יסייע לחוקרים באמצעות מודל חיידקי עכבר נגוע במטרה לענות על שאלות ביולוגיות מיקרוביולוגית חשוב ביסודו.
Protocol
Discussion
כדי להשתמש במערכת, זה הכרחי עבור החוקר ללמוד איך gavage החיות. אנו פרט מתודולוגיה להכין התרבות חיידקים gavage העכברים. כמו כן, אנו מראים כיצד לפקח על התמדה סלמונלה בדרכי (GI) במערכת העיכול. השלבים הקריטיים פרוטוקול זה כולל:
- <li style=";text-align:right;direction:…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי KO1 NIDDK DK075386 מענק האגודה האמריקנית למלחמה בסרטן RSG-09-075-01-MBC עד יוני יום ראשון
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| HBSS | Sigma | ABCD1234 | ||
| Luria-Bertani broth | BD | 244610 | ||
| Feeding needle | Popper & Sons, Inc | 7920 | ||
| Streptomycin | MP biomedicals, LLC | 100556 | ||
| BBL CHROMagar Salmonella | BD | 214983 | ||
| Disposable cell spreaders | Biologix research company | 65-1010 |
Riferimenti
- Duan, Y. beta-Catenin activity negatively regulates bacteria-induced inflammation. Lab Invest. 87 (6), 613-624 (2007).
- Barthel, M. Pretreatment of mice with streptomycin provides a Salmonella enterica serovar Typhimurium colitis model that allows analysis of both pathogen and host. Infection and immunity. 71 (5), 2839-2858 (2003).
- Miller, S. I., Mekalanos, J. J. Constitutive expression of the phoP regulon attenuates Salmonella virulence and survival within macrophages. Journal of bacteriology. 172 (5), 2485-2490 (1990).
- Valdez, Y. Nramp1 expression by dendritic cells modulates inflammatory responses during Salmonella Typhimurium infection. Cell Microbiol. 10 (8), 1646-1661 (2008).
- Woo, H., Okamoto, S., Guiney, D., Gunn, J. S., Fierer, J. A model of Salmonella colitis with features of diarrhea in SLC11A1 wild-type mice. PLoS ONE. 3 (2), e1603-e1603 (2008).
- Dangl, J. L. Molecular call-and-response: how Salmonella learns the gospel from its host. Trends Microbiol. 11 (6), 245-246 (2003).
- Zaharik, M. L., Vallance, B. A., Puente, J. L., Gros, P., Finlay, B. B. Host-pathogen interactions: Host resistance factor Nramp1 up-regulates the expression of Salmonella pathogenicity island-2 virulence genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99, 15705-15710 (2002).
- Townsend, P., Morton, D. B. Laboratory Animal Care Policies and Regulations: United Kingdom. ILAR J. 37 (2), 68-74 (1995).
- Olfert, E. D., Godson, D. L. Humane endpoints for infectious disease animal models. ILAR J. 41 (2), 99-104 (2000).
- Ye, Z., Petrof, E. O., Boone, D., Claud, E. C., Sun, J. Salmonella effector AvrA regulation of colonic epithelial cell inflammation by deubiquitination. Am J Pathol. 171 (3), 882-892 (2007).
- Grassl, G. A., Valdez, Y., Bergstrom, K. S., Vallance, B. A., Finlay, B. B. Chronic enteric salmonella infection in mice leads to severe and persiste nt intestinal fibrosis. Gastroenterology. 134 (3), 768-780 (2008).
- Sukupolvi, S., Edelstein, A., Rhen, M., Normark, S. J., Pfeifer, J. D. Development of a murine model of chronic Salmonella infection. Infection and immunity. 65 (2), 838-842 (1997).
- . . Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL). , (2007).
- Wu, S., Lu, R., Zhang, Y., Sun, J. Chronic effects of a Salmonella type III secretion effector protein AvrA in vivo. PLoS ONE. , (2010).
