Kronisk Salmonella Infected musmodell
Summary
Upprätta en kronisk bakteriell infekterad musmodell med ihållande<em> Salmonella</em> Typhimurium kolonisering i tarmen ytterligare 27 veckor.
Abstract
Den bakterie infekterade musmodell är ett kraftfullt modellsystem för att studera områden som infektion, inflammation, immunologi, signaltransduktion, och Tumörgenesens. Många forskare har dragit nytta av kolit inducerad av<em> Salmonella</em> Typhimurium för studier av den tidiga fasen av inflammation och infektion. Men bara ett fåtal rapporter på kronisk infektion<em> In vivo</em>. Möss med<em> Salmonella</em> Ihållande existens i mag-tarmkanalen ger oss möjlighet att utforska den långsiktiga host-bakteriell interaktion, signaltransduktion, och Tumörgenesens. Vi har etablerat en kronisk bakteriell infekterad musmodell med<em> Salmonella</em> Typhimurium kolonisationen i musen tarmen över 6 månader. För att använda detta system är det nödvändigt för forskaren att lära sig att förbereda bakterieodling och sondmatning djuren. Vi detalj en metod för att förbereda bakteriekultur och sondmatning möss. Vi visar också hur man kan upptäcka<em> Salmonella</em> Persistens i mag-tarmkanalen. Sammantaget kommer detta protokoll bistånd forskare som använder den bakteriella smittade musmodell för att ta itu principiellt viktiga biologiska och mikrobiologiska frågor.
Protocol
Discussion
För att använda detta system är det nödvändigt för forskaren att lära sig att sondmatning djuren. Vi detalj en metod för att förbereda bakteriekultur och sondmatning till möss. Vi visar också hur man kan övervaka Salmonella persistens i gastrointestinal (GI) tarmkanalen. Den kritiska steg i detta protokoll, inklusive:
- Streptomycin-förbehandling: streptomycin-förbehandling kan bli av med några kommensala tarmflora och göra möss mottagliga för salmonella infektion 2.</…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete stöddes av NIDDK KO1 DK075386 bidrag och American Cancer Society RSG-09-075-01-MBC till juni Sön
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| HBSS | Sigma | ABCD1234 | ||
| Luria-Bertani broth | BD | 244610 | ||
| Feeding needle | Popper & Sons, Inc | 7920 | ||
| Streptomycin | MP biomedicals, LLC | 100556 | ||
| BBL CHROMagar Salmonella | BD | 214983 | ||
| Disposable cell spreaders | Biologix research company | 65-1010 |
Riferimenti
- Duan, Y. beta-Catenin activity negatively regulates bacteria-induced inflammation. Lab Invest. 87 (6), 613-624 (2007).
- Barthel, M. Pretreatment of mice with streptomycin provides a Salmonella enterica serovar Typhimurium colitis model that allows analysis of both pathogen and host. Infection and immunity. 71 (5), 2839-2858 (2003).
- Miller, S. I., Mekalanos, J. J. Constitutive expression of the phoP regulon attenuates Salmonella virulence and survival within macrophages. Journal of bacteriology. 172 (5), 2485-2490 (1990).
- Valdez, Y. Nramp1 expression by dendritic cells modulates inflammatory responses during Salmonella Typhimurium infection. Cell Microbiol. 10 (8), 1646-1661 (2008).
- Woo, H., Okamoto, S., Guiney, D., Gunn, J. S., Fierer, J. A model of Salmonella colitis with features of diarrhea in SLC11A1 wild-type mice. PLoS ONE. 3 (2), e1603-e1603 (2008).
- Dangl, J. L. Molecular call-and-response: how Salmonella learns the gospel from its host. Trends Microbiol. 11 (6), 245-246 (2003).
- Zaharik, M. L., Vallance, B. A., Puente, J. L., Gros, P., Finlay, B. B. Host-pathogen interactions: Host resistance factor Nramp1 up-regulates the expression of Salmonella pathogenicity island-2 virulence genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99, 15705-15710 (2002).
- Townsend, P., Morton, D. B. Laboratory Animal Care Policies and Regulations: United Kingdom. ILAR J. 37 (2), 68-74 (1995).
- Olfert, E. D., Godson, D. L. Humane endpoints for infectious disease animal models. ILAR J. 41 (2), 99-104 (2000).
- Ye, Z., Petrof, E. O., Boone, D., Claud, E. C., Sun, J. Salmonella effector AvrA regulation of colonic epithelial cell inflammation by deubiquitination. Am J Pathol. 171 (3), 882-892 (2007).
- Grassl, G. A., Valdez, Y., Bergstrom, K. S., Vallance, B. A., Finlay, B. B. Chronic enteric salmonella infection in mice leads to severe and persiste nt intestinal fibrosis. Gastroenterology. 134 (3), 768-780 (2008).
- Sukupolvi, S., Edelstein, A., Rhen, M., Normark, S. J., Pfeifer, J. D. Development of a murine model of chronic Salmonella infection. Infection and immunity. 65 (2), 838-842 (1997).
- . . Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL). , (2007).
- Wu, S., Lu, R., Zhang, Y., Sun, J. Chronic effects of a Salmonella type III secretion effector protein AvrA in vivo. PLoS ONE. , (2010).
