Summary

Kronik Salmonella Infected Fare Modeli

Published: May 31, 2010
doi:

Summary

Kalıcı kronik bakteriyel enfekte fare modelinin oluşturulması<em> Salmonella</em> 27 hafta boyunca bağırsak kolonizasyonu typhimurium.

Abstract

Bakteri enfekte fare modelinde, enfeksiyon, enflamasyon, immünoloji, sinyal iletimi, ve tümörogenez gibi alanlarda çalışmak için güçlü bir model sistem. Birçok araştırmacı tarafından uyarılan kolit avantajı almış<em> Salmonella</em> Inflamasyon ve enfeksiyon erken faz çalışmaları için typhimurium. Ancak, sadece birkaç raporlar kronik enfeksiyon<em> In vivo</em>. Ile Fare<em> Salmonella</em> Gastrointestinal sistem kalıcı varlığını bize uzun vadeli ev sahibi-bakteriyel etkileşimi, sinyal iletimi, ve tümörogenez keşfetmek için izin verir. Biz bir kronik bakteriyel enfekte fare modeli kurduk<em> Salmonella</em> 6 ay içinde fare bağırsakta typhimurium kolonizasyon. Bu sistemi kullanmak için, araştırmacı bakteri kültürü hazırlamak ve hayvanların gavaj öğrenmek için gerekli. Hazırlamak bakteri kültürü ve sonda fareler için detay bir metodoloji. Biz de tespit etmek için nasıl<em> Salmonella</em> Gastrointestinal sistem sebat. Genel olarak, bu protokol, temelde önemli biyolojik ve mikrobiyolojik soruları yanıtlamak için bakteri enfekte fare modeli kullanılarak araştırmacılar yardımcı olacaktır.

Protocol

Bakteri kültürü, fare sonda ve Salmonella tespiti: Bu protokol, üç porsiyon içerir . 1. Salmonella büyüme durumdur. ° C gecede 37 inkübe Salmonella Luria Bertani suyu (LB) plaka hazırlayın. LB plaka seçin ve bir klon, 7 ml LB, 12 ml tüp içine koyun ve 37 ° C'de yaklaşık 5 saat boyunca sallamak. 37 ° C'de yaklaşık 18 saat sallayarak olmadan sabit bir faz kültür ve inkübe 0.05 ml, 50 ml LB inoküle edin. …

Discussion

To use this system, it is necessary for the researcher to learn how to gavage the animals. We detail a methodology for prepare bacterial culture and gavage the mice. We also show how to monitor the Salmonella persistence in the gastrointestinal (GI) tract. The critical steps in this protocol including:

  1. Streptomycin-pretreatment: Streptomycin-pretreatment could get rid of some commensal gut flora and make the mice susceptible to the Salmonella infection2.
  2. Salmonell…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma NIDDK KO1 DK075386 hibe ve Amerikan Kanser Derneği Haziran Sun RSG-09-075-01-MBC tarafından desteklenmiştir.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
HBSS   Sigma ABCD1234  
Luria-Bertani broth   BD 244610  
Feeding needle   Popper & Sons, Inc 7920  
Streptomycin   MP biomedicals, LLC 100556  
BBL CHROMagar Salmonella   BD 214983  
Disposable cell spreaders   Biologix research company 65-1010  

Riferimenti

  1. Duan, Y. beta-Catenin activity negatively regulates bacteria-induced inflammation. Lab Invest. 87 (6), 613-624 (2007).
  2. Barthel, M. Pretreatment of mice with streptomycin provides a Salmonella enterica serovar Typhimurium colitis model that allows analysis of both pathogen and host. Infection and immunity. 71 (5), 2839-2858 (2003).
  3. Miller, S. I., Mekalanos, J. J. Constitutive expression of the phoP regulon attenuates Salmonella virulence and survival within macrophages. Journal of bacteriology. 172 (5), 2485-2490 (1990).
  4. Valdez, Y. Nramp1 expression by dendritic cells modulates inflammatory responses during Salmonella Typhimurium infection. Cell Microbiol. 10 (8), 1646-1661 (2008).
  5. Woo, H., Okamoto, S., Guiney, D., Gunn, J. S., Fierer, J. A model of Salmonella colitis with features of diarrhea in SLC11A1 wild-type mice. PLoS ONE. 3 (2), e1603-e1603 (2008).
  6. Dangl, J. L. Molecular call-and-response: how Salmonella learns the gospel from its host. Trends Microbiol. 11 (6), 245-246 (2003).
  7. Zaharik, M. L., Vallance, B. A., Puente, J. L., Gros, P., Finlay, B. B. Host-pathogen interactions: Host resistance factor Nramp1 up-regulates the expression of Salmonella pathogenicity island-2 virulence genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99, 15705-15710 (2002).
  8. Townsend, P., Morton, D. B. Laboratory Animal Care Policies and Regulations: United Kingdom. ILAR J. 37 (2), 68-74 (1995).
  9. Olfert, E. D., Godson, D. L. Humane endpoints for infectious disease animal models. ILAR J. 41 (2), 99-104 (2000).
  10. Ye, Z., Petrof, E. O., Boone, D., Claud, E. C., Sun, J. Salmonella effector AvrA regulation of colonic epithelial cell inflammation by deubiquitination. Am J Pathol. 171 (3), 882-892 (2007).
  11. Grassl, G. A., Valdez, Y., Bergstrom, K. S., Vallance, B. A., Finlay, B. B. Chronic enteric salmonella infection in mice leads to severe and persiste nt intestinal fibrosis. Gastroenterology. 134 (3), 768-780 (2008).
  12. Sukupolvi, S., Edelstein, A., Rhen, M., Normark, S. J., Pfeifer, J. D. Development of a murine model of chronic Salmonella infection. Infection and immunity. 65 (2), 838-842 (1997).
  13. . . Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL). , (2007).
  14. Wu, S., Lu, R., Zhang, Y., Sun, J. Chronic effects of a Salmonella type III secretion effector protein AvrA in vivo. PLoS ONE. , (2010).
check_url/it/1947?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Wu, S., Lu, R., Zhang, Y., Sun, J. Chronic Salmonella Infected Mouse Model. J. Vis. Exp. (39), e1947, doi:10.3791/1947 (2010).

View Video