Murino hepática Bioluminiscente modelo tumoral
Summary
En este artículo se describe un procedimiento para la inducción de tumores en el hígado ortotópico bioluminiscentes en ratones, y el posterior análisis del crecimiento del tumor confinado al hígado, con imágenes en directo toda la luminiscencia del cuerpo.
Abstract
Este video describe la creación de metástasis hepáticas en un modelo de ratón que puede ser analizada por imágenes bioluminiscentes. Las células tumorales son administrados específicamente al hígado para provocar un tumor hepático localizado, a través de la movilización del bazo y la división en dos, dejando intacto el pedículo vascular para cada mitad del bazo. Lewis células de carcinoma de pulmón que expresan constitutivamente el gen de la luciferasa de luciérnaga (luc1) se inoculan en una hemi-bazo, que luego se resecaron 10 minutos más tarde. El otro hemisferio del bazo se mantiene intacta y se devuelve al abdomen. El crecimiento de tumores hepáticos pueden ser monitoreados por imágenes de bioluminiscencia con el IVIS todo el sistema de imagen del cuerpo. Imagen cuantitativa del crecimiento tumoral con IVIS ofrece cuantificación precisa de las células tumorales viables. La muerte celular y necrosis del tumor, debido al tratamiento farmacológico está indicado temprano por la reducción de la señal bioluminiscente. Este modelo de ratón permite investigar los mecanismos subyacentes de las células tumorales metastásicas supervivencia y el crecimiento y puede ser utilizado para la evaluación de la terapéutica de las metástasis hepáticas.
Protocol
Discussion
El desarrollo de la confianza en modelos in vivo para el estudio de las metástasis hepáticas se está convirtiendo cada vez más importante con el advenimiento de nuevas estrategias terapéuticas. Para el estudio preciso de las nuevas estrategias, modelos animales debería ser relativamente fácil de realizar, forma un importante número de metástasis, la participación de todos los pasos de la cascada metastásica, y tienen un sistema reportero que permite la detección y el recuento de un número …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado a través del sur de Cork Hospital Victoria de fondos del Hospital Universitario de mama, la Sociedad del Cáncer de Irlanda (CRI07TAN) y el Centro de Investigación del Cáncer Cork. De pulmón Lewis línea celular estable que expresa la luciferasa fue una especie de regalo de la Dra. Karin Jooss, Cell Genesys, Inc., San Francisco, EE.UU..
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
Riferimenti
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- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H. Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristic. World J Gastroenterol. 4, 409-411 (1998).
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