소프트 Musculoskeletal 조직에서 줄기 세포를 분리
Summary
플라스크에 세포의 준수 속도에 따라 musculoskeletal 부드러운 조직에서 분리 성인 줄기 세포.
Abstract
성인 줄기 세포는 긴 재생 의료에서 응용 프로그램에 관해서 논의했습니다. 성인 줄기 세포는 여러 혈통이 세포 분화 및 자기 갱신 능력을 받아야하기 때문에 그들의 인상적인 기능으로 부상하고 병에 걸린 조직을 치료에 대한 흥분의 큰 거래를 생성합니다. 가장 중요한 것은, 이러한 자질은 autologous 세포 이식 요법에 사용하기 위해 그들이 유리 만들었습니다. 현재 프로토콜은 musculoskeletal 시스템, 예를 들어, 힘줄 및 근육의 부드러운 조직 1의 수정된 preplate 기술에 독자를 소개합니다<sup> 일</sup> 매체와 콜라겐 코팅 flasks에 배치 효소 dissociated 후. 중간 나머지 부동 세포로 구성되어 있습니다 뜨는은, 순차적으로 새로운 flasks 매일 전송됩니다. 줄기 세포는 일반적으로 (시리얼 전송 또는 preplates) 5-7일 소요되는 flasks을 준수하기 위해 느린 있습니다. 이 방법을 사용하여, 성인의 줄기 세포가이 조직에있는 쉽게 상당히 비침습 절차를 통해 수확 수 있습니다.
Protocol
Discussion
그것은 일부 성인 조직이 여러 개의 줄기 세포가 포함되어있다는 사실을 인정했습니다. 연구의 지난 몇 년 동안, 줄기 세포는 골격근과 힘줄을 포함한 부드러운 musculoskeletal 조직에서 발견되었습니다. 성공적으로 힘줄과 골격 근육에서 성인 줄기 세포를 분리하기 위해 실험실에서 사용되었습니다 수정된 preplate 기술로 알려진이 현재의 프로토콜은 세부 절차를. 세포 위에서 설명한 수정된 preplate …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 현재 영화 '씨 카일 홀덴 및 슬라이드 편집 그들의 도움 씨 조나단 루카스에 대한 세포 격리 그들의 기술 도움을 양 Haiying 팬 씨와 이안 Bellayr의 크게 감사하고 있습니다. DRS : 지난 년 동안 수정된 preplate 기술의 개발에 관여했습니다 사람의 다음과 같은 목록에 많은 감사드립니다. Burhan Gharaibeh, BaoHong 카오, Deasy 브리짓, 토마스 R. 페인, Aiping 루, Hairong 펭, 히데키 오시마, 보 Zeng, Xiaodong 뮤, Kimimasa 도비타, 론 Jankowski, Makato Ikezawa. 우리는 제임스 H. 커밍, 라이언 Pruchnic, 요셉 Feduska, 레베카 C. Schugar, Haiying 팬과 제시카 Tebbets의 기술 지원에 감사하고 있습니다. 저자는 또한 근육질 영양 장애 협회 (MDA), 국립 보건원 (NIH), 국방부 (DOD), UPMC의 피츠버그의 아동 병원의학과이 작품에 대한 재정 지원을 인정하고 싶습니다 정형 외과 외과, 그리고 피츠버그 대학.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | #11995-073 | ||
| FBS | Invitrogen | #10437-028 | ||
| Heat-inactivated horse serum | Invitrogen | #26050-088 | ||
| Chick embryo extract | Accurate Chemical | #CE650T-10 | ||
| 100U ml penicillin/streptomycin | Invitrogen | #15140-122 | ||
| Dulbecco’s PBS | Invitrogen | #14190-250 | ||
| Hank’s Buffered Salt Solution | Invitrogen | #24020-117 | ||
| Collagenase type XI 0.2%(wt/vol) | Sigma-Aldrich | #C7657 | ||
| Dispase2.4U ml | Invitrogen | #17105-041 | ||
| Trypsin-EDTA0.5%(wt/vol) (10x;5g liter trypsin (1:250) | Invitrogen | #15400-054 | ||
| Collagen for coating flask : Type I collagen derived from calf skin 0.1 g liter | Sigma-Aldrich | #C-9791 | ||
| DMSO | Sigma | #D-2650 |
Riferimenti
- Gharaibeh, B. Isolation of a slowly adhering cell fraction containing stem cells from murine skeletal muscle by the preplate technique. Nat Protoc. 3, 1501-1509 (2008).
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