파라핀에 성인 Drosophila 머리를 포함: 조직학을 위한 조직 준비

Abstract

출처: Sunderhaus, E. R., 크레츠슈마르, D. 매스 히스토로지에서 드로소필라의 신경 변성을 정량화합니다. J. 비스 익스펙. (2016).

이 비디오는 드로소필라 머리를 파라핀에 포함시키는 방법을 설명하며, 이는 직렬 단면을 위해 날아다니는 머리를 준비하는 기술입니다. 파라핀 섹션은 뇌의 해부학및 신경 변성의 평가를 위해 조직학적 검사에 사용됩니다. 이 프로토콜은 한 번의 준비에서 여러 개의 파리를 처리하는 방법을 보여 주므로 시간 효율성을 높이고 실험 아티팩트를 최소화합니다.

Protocol

이 프로토콜은 Sunderhaus와 크레츠슈마르에서발췌, 드로소필라에서신경 변성을 정량화하는 질량 히스토리, J. Vis. Exp. (2016). 1. 파라핀에 머리를 고정하고 칼라에 포함 참고: 고정 프로세스의 모든 단계는 연기 후드에서 수행해야합니다. 메틸벤조아테는 건강상의 위험을 초래하지 는 않지만 연…

Representative Results

그림 1: 파라핀 시리얼 섹션. A) 칼라 방법을 사용하여 실험 및 제어 파리를 하나의 칼라에 스레딩하여 하나의 샘플로 처리 할 수 있습니다. 눈없는 죄 오큘리스 파리는 방향 (화살표)에 삽입됩니다. B) 칼라에 플라이 헤드의 방향을 보여주는 회로도. C) 이 이미지에서 다른 플라?…

Materials

Collar	Genesee Scientific	TS 48-100	We are using custom made collars that are made from one piece of metal instead of layers as the ones by Genesee.
Rubber ice cube tray for embedding	Household store		The size can be made-to-fit by glueing in additional walls
Crystallizing dish	Fisher Scientific Company	08-762-3
Ether	Fisher Scientific Company	E138-1
Ethanol	Decon Laboratories Inc.	2701
Choloroform	Fisher Scientific Company	C298-500
Glacial Acetic Acid	Fisher Scientific Company	A38-212
Methylbenzoate	Fisher Scientific Company	M205-500	Distinct Odor – Use in fume hood!
Low Melting Point Paraffin Wax	Fisher Scientific Company	T565	Make sure to keep extra melted in a 65 °C waterbath