Встраивание взрослых Drosophila головы в Парафин: Подготовка ткани для гистологии

Abstract

Источник: Sunderhaus, E. R., Kretzschmar, D. Массовая гистология для количественной нейродегенерации в Дрозофиле . J. Vis. Exp. (2016).

Это видео описывает, как вставлять drosophila головы в парафин с помощью воротника метод, метод, который готовит летать головы для последовательного сечения. Парафиновые секции используются для гистологических исследований анатомии мозга и для оценки нейродегенерации. Протокол показывает, как несколько мух могут быть обработаны в одном препарате, тем самым повышая эффективность времени и минимизируя экспериментальные артефакты.

Protocol

Этот протокол является выдержкой из Sunderhaus и Kretzschmar, Массовая гистология для количественной нейродегенерации в Drosophila, J. Vis. Exp. (2016). 1. Фиксация головы на воротники и встраивания в Парафин ПРИМЕЧАНИЕ: Все шаги в про…

Representative Results

Рисунок 1: Парафин Серийные разделы. A) Используя метод воротника, экспериментальные и контрольные мухи могут быть обработаны в качестве одного образца путем резьбы их на один воротник. Для ориентации (стрелки) вставляютс…

Materials

Collar	Genesee Scientific	TS 48-100	We are using custom made collars that are made from one piece of metal instead of layers as the ones by Genesee.
Rubber ice cube tray for embedding	Household store		The size can be made-to-fit by glueing in additional walls
Crystallizing dish	Fisher Scientific Company	08-762-3
Ether	Fisher Scientific Company	E138-1
Ethanol	Decon Laboratories Inc.	2701
Choloroform	Fisher Scientific Company	C298-500
Glacial Acetic Acid	Fisher Scientific Company	A38-212
Methylbenzoate	Fisher Scientific Company	M205-500	Distinct Odor – Use in fume hood!
Low Melting Point Paraffin Wax	Fisher Scientific Company	T565	Make sure to keep extra melted in a 65 °C waterbath