Yetişkin Drosophila Kafalarını Parafin'e Gömmek: Histoloji için Doku Hazırlama
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Sunderhaus, E. R., Kretzschmar, D. Drosophila’da Nörodejenerasyonunu Ölçmek için Kitle Histolojisi . J. Vis. Exp. (2016).
Bu videoda, seri kesitler için sinek kafaları hazırlayan bir teknik olan yaka yöntemini kullanarak Drosophila kafalarının parafin içine nasıl gömülecekleri açıklanmaktadır. Parafin bölümleri beynin anatomisinin histolojik incelemeleri ve nörodejenerasyonun değerlendirilmesi için kullanılır. Öne çıkan protokol, birden fazla sineklerin tek bir hazırlıkta nasıl işlenebileceğini, böylece zaman verimliliğinin artırılabileceğini ve deneysel eserlerin en aza indirilebileceğini göstermektedir.
Protocol
Bu protokol, Drosophila, J. Vis. Exp’teNörodejenerasyon’u Ölçmek için Sunderhaus ve Kretzschmar, Mass Histology’den bir alıntıdır. (2016). 1. Başı Yakalara Sabitlemek ve Parafin’e Gömmek NOT: Fiksasyon sürecindeki tüm adımlar dumanlı bir başlıkta yapılmalıdır. Metilbenzoat, sağlık riski oluşturmasa da, duman kaputunda ele alınmazsa ezici olabilen oldukça beli…
Representative Results
Şekil 1: Parafin Seri Bölümleri. A) Yaka yöntemi kullanılarak deneysel ve kontrol sinekleri tek yaka üzerine geçirilerek tek örnek olarak işlenebilir. Gözsüz sinüs oculis sinekleri oryantasyon için yerleştirilir (oklar). B) Yakadaki sinek başlarının yönünü gösteren şematik. C) Bu resimde, farklı sinek kafalarından bölümler slaytta soldan…
Materials
| Collar | Genesee Scientific | TS 48-100 | We are using custom made collars that are made from one piece of metal instead of layers as the ones by Genesee. |
| Rubber ice cube tray for embedding | Household store | The size can be made-to-fit by glueing in additional walls | |
| Crystallizing dish | Fisher Scientific Company | 08-762-3 | |
| Ether | Fisher Scientific Company | E138-1 | |
| Ethanol | Decon Laboratories Inc. | 2701 | |
| Choloroform | Fisher Scientific Company | C298-500 | |
| Glacial Acetic Acid | Fisher Scientific Company | A38-212 | |
| Methylbenzoate | Fisher Scientific Company | M205-500 | Distinct Odor – Use in fume hood! |
| Low Melting Point Paraffin Wax | Fisher Scientific Company | T565 | Make sure to keep extra melted in a 65 °C waterbath |
Citazione di questo articolo
Embedding Adult Drosophila Heads in Paraffin: Preparing Tissue for Histology. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20112, doi: (2023).